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氯沙坦对肺纤维化大鼠一氧化氮及内皮素1合成影响 　论文联盟编辑。 作者：裴毓华，扬春松，丁佑铭 【摘要】 目的 观察肺脏一氧化氮（NO）和内皮素1（ET1）在抗肿瘤药物博莱霉素（BLM）所致大鼠肺间质纤维化过程中的动态变化，探讨氯沙坦对大鼠肺纤维化模型的 影响 及其作用机制。 方法 45只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组和氯沙坦 治疗 组，气管内灌注BLM造成肺纤维化模型，灌注次日开始灌胃给药。观察各组动物肺脏病理组织学改变、血浆及肺组织中NO2-/NO3-、ET1含量、肺组织羟脯氨酸含量的变化。结果 肺组织及血浆中NO2-/NO3-含量在气管灌注BLM后迅速上升，第14天达高峰（与空白组相比，P＜0.01），于第28天基本恢复正常。肺中ET1水平也明显升高（与空白组相比，P＜0.01）。氯沙坦能显著降低肺中NO、ET1的升高，延缓肺纤维化的 发展 。结论 NO和ET1在BLM所致肺间质纤维化的发生发展中起重要作用，氯沙坦能通过抑制NO、ET1的产生达到治疗肺纤维化的目的。 【关键词】 氯沙坦 肺纤维化 博莱霉素 一氧化氮 内皮素1 Effect of Losartan on Nitric Oxide and Endothelin1 in the Development of Blomycininduced Pulmonary Fibrosis in Rats 论文代写 Key words：Losartan; Pulmonary fibrosis; bleomycin； Nitric oxide; Endothelin1 论文代写 　肺间质纤维化常是博莱霉素（BLM）、平阳霉素等抗肿瘤药物引起的严重不良反应，也是多种肺部疾病发展的最后阶段，发病机制复杂，且无有效治疗手段。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ARB）在临床 应用 极广，但关于其治疗肺纤维化的实验 研究 较少，本文拟就氯沙坦对博莱霉素所致的大鼠肺纤维化模型中一氧化氮（Nitric oxide，NO）和内皮素（Endothelin，ET）的影响进行研究，探讨ARB治疗肺纤维化的作用机制。 1材料与方法 1.1材料 BLM为天津河北制药厂产品，使用时以生理盐水配制成5mg/L；氯沙坦为默沙东公司产品；NO羟脯氨酸检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；ET1放射免疫检测试剂盒购于北京东亚免疫技术研究所。 1.2实验动物及分组 武汉大学医学动物中心提供的健康Wistar大鼠45只，雌雄不拘，体重180～240g，按每组15只随机分为3组：空白组（C组）、模型组（B组）和氯沙坦治疗组（L组）。大鼠用乙醚麻醉后，按5mg/kg气管内灌注博莱霉素制作肺纤维化模型；空白组气管内注入相应体积的生理盐水。次日开始灌胃给药，分别给予生理盐水（C组，B组）、氯沙坦10mg/kg（L组）。3组动物均在气管内灌药后第7、14、28d各随机处死5只。 1.3观测指标及方法 毕业论文 1.3.1病理组织学改变 各组动物在处死当日腹腔注射2% 戊巴比妥钠（2ml/kg）麻醉，打开胸腔，完整分离出气管和双肺，用预冷的生理盐水冲洗后滤纸吸干。摘取左肺，经主支气管向肺内注入10%中性福尔马林，使胸膜展开，结扎主支气管后置10%中性福尔马林液中固定，沿肺门至胸膜行最大切面取材，常规制成5μm厚石蜡切片，行HE染色。 1.3.2肺组织羟脯氨酸含量的测定 将肺组织按100mg加入1ml生理盐水的比例制备组织匀浆，用酸解法测定肺组织羟脯氨酸浓度，用考马斯亮蓝蛋白法测定匀浆组织中蛋白含量。 1.3.3血浆及肺组织中NO2-/NO3-含量的测定 收集左颈总动脉血，分离血浆，置-20℃备用。取右下肺组织100mg，加生理盐水1ml，碾磨匀浆后离心20min，取上清-20℃保存。采用硝酸还原酶显色法，以比色法记取OD值，用标准曲线法 计算 NO2-/NO3-含量代表NO含量。 论文代写 1.3.4血浆及肺组织中ET1含量的测定 取血2ml，分离血浆，-20℃保存；测定前室温复融，3000r/min 离心5min，取上清液测定ET1含量。称取约100mg右下肺组织放入1mol/L 醋酸1ml 中略作碾磨，煮沸10min，匀浆，离心，取上清保存；测定时用5倍的0.1mol/L，pH7.4，内含1g/L BSA，1g/L NaN3，1g/L NaCl，0.1% (V/V) Triton X100缓冲液稀释。采用非平衡放射免疫法测定。 1.4统计学处理 实验数据以±s表示，采用SPSS12.0统计软件,行方差 分析 及q检验，Plt;0.05为有统计学意义。 论文代写