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海藻糖用于血细胞冻干保存中探究进展 　【摘要】 冰冻干燥方法是保存血细胞最佳的方法，因为冻干的血细胞制品能在常温下保存，性能稳定，保存时间长，便于运输，保存费用低廉等优势，解决了目前血细胞保存的局限性。然而，在冻干过程中血细胞膜的损伤、细胞功能的降低是一个重要的问题。目前，研究者多以海藻糖为保护剂，将海藻糖导入血细胞内，对血细胞进行冻干。本文主要综述冻干对血细胞损伤机理，海藻糖对血细胞冻干过程中的保护机制及海藻糖在血细胞冻干保存中的研究现状。 【关键词】 海藻糖 　　Research Progress on Trehalose Used in Lyophilization of Blood Cells —— Review 　　Abstract Lyophilization is the best method for preservation of blood cells at present.Lyophilized blood cells could be stored at room temperature for long periods of time，while maintaining a high degree of viability.Lyophilized blood cells facilitates transportation and the costs are low.However，the membrane of blood cells is damaged and viability of blood cells is decressed in lyophilization.Trehalose has been shown to protect membrane，proteins and nucleic acids during freezing and desiccation.Now，researchers present a methor for loading blood cells with trehalose.In this paper，damage effect of lyophilization on blood cells，the mechanism of trehalose protection and the experimantal studies on trehalose were reviewed. 　　Key words trehalose; blood cells; lyophilization 目前，红细胞、血小板和造血干细胞的保存多采用常温下的短期保存和深低温的长期保存。此两种保存方法均需要笨重的冰箱和存储设备，保存费用昂贵，在保存和运输进程中受到诸多自然、环境因素的限制，远远不能满足临床应用。由于冻干血细胞能在常温下保存，保存时间长，性能比较稳定，输注方便，保存费用低廉，便于运输等优点，血细胞的冻干保存已成研究热点。冻干红细胞、血小板的研制成功将会改善临床用血短缺状况，对战伤和急诊救助有重大的应用价值；造血干细胞的冻干保存给恶性血液病患者的治疗带来新的曙光。 血细胞的冷冻干燥过程一般包含预冻、初级干燥、次级干燥三个步骤。在此过程中细胞的生存条件、物理状态均发生变化，构成细胞的膜蛋白及磷脂存在一定程度的变性，影响细胞器的功能活动，细胞的生活力下降。如何最大限度的抑制细胞成分的变性，保持细胞原有的活力，一直是血细胞冻干保存研究的重点。存在于一些微生物、低温休眠动物和耐干旱植物中的海藻糖引起人们的关注。海藻糖是葡萄糖的二聚体，是一种非还原性保护剂，在低温、干燥状态下对生物材料有保护作用。是低温生物领域最佳的保护剂。现就海藻糖在血细胞冻干保存中的作用机制及应用现状综述如下。 　　冷冻干燥对血细胞的损伤机制 　　冷冻对血细胞的损伤 　　血细胞在预冻过程中，细胞内的水分结冰，体积膨大，细胞内冰晶对细胞膜及细胞器膜产生机械损伤。细胞外水分结冰、细胞外的溶质浓度升高、 渗透压增高、 pH 值改变，导致构成细胞的蛋白变性、 细胞脱水死亡。 如何减少胞内外冰晶的形成是防止预冻时细胞损伤的关键所在。 低温生物工程大量的实验证明：对不同种类的细胞选择最佳的冷却速率，是细胞内外冰晶生成最少且最小的必要条件［1］。生物样品的玻璃化保存是避免冰晶生成的主要措施，也是实现生物体低温保存的主要途径。所谓玻璃化，主要是指液体转变为非晶态（玻璃化）的固化过程，玻璃态固体分子之间的距离与液态分子间距离没有区别，不形成冰晶。20世纪50年代，Smith用甘油做保护剂，采用100℃/min的冷却速率，取得了红细胞低温保存的成功，很快用于临床输注。1996年Pellerin-Mendes和他的合作者［2