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白血病细胞株及人骨髓有核细胞中表达
白血病细胞株及人骨髓有核细胞中表达
作者:孙斌,仇灏,胡从莉,沈宏杰,岑建农,吴士良
【摘要】 目的: 从mRNA水平观察不同白血病细胞和人骨髓标本中糖基转移酶β3GalT7/GnT8和β3GnT2的表达情况。 方法: 采用RTPCR技术,在8种白血病细胞株及24例白血病患者骨髓有核细胞中检测β3GalT7/GnT8,β3GnT2 mRNA水平的表达,以10例正常成人骨髓有核细胞作相对正常对照。结果: β3GalT7/GnT8在SHI1,THP1,HL60,K562,NB4,U937细胞和18例初诊白血病患者骨髓标本中有不同程度的表达,在KG1,Raji细胞和相对正常对照中没有表达;β3GnT2在SHI1,THP1,HL60,K562,NB4,U937,Raji细胞,4例相对正常对照和16例初诊白血病患者骨髓标本中有不同程度的表达,在KG1细胞中和6例相对正常对照中没有表达。 结论:3GalT7/GnT8和β3GnT2与白血病的发生发展存在一定的关系,其mRNA的表达水平可以作为白血病早期诊断的一个标志。
【关键词】 糖基转移酶; 白血病; 表达差异; RTPCR
[Abstract]Objective: To observe the expression of β3GalT7/GnT8 and β3GnT2 gene in different leukemia cells and patients on mRNA level. Methods: RTPCR was used to detect the mRNA expression in 8 leukemia cells,24 patients and bone marrow of 10 normal persons. Results: Different expression level of 3GalT7/GnT8 can be found in leukemia cells SHI1, THP1, HL60, K562, NB4, U937 and 18 patients who were leukemia at first diagnosis, but never found in leukemia cell Raji,KG1 and bone marrow of normal persons;β3GnT2 expressed in SHI1,THP1,HL60,K562,NB4,U937,Raji,16 patients and 4 bone marrow of normal persons, never found in KG1 and 6 bone marrow of normal persons. Conclusion: β3GalT7/GnT8 and β3GnT2 expression level were related to diagnosis of leukemia.
[Key words]Glycosyltransferase; leukemia; different expression; RTPCR
白血病是造血系统的恶性肿瘤,是我国最常见的恶性肿瘤之一。其特点是骨髓及其他造血组织中大量白血病细胞无限制的增生,浸润全身各组织和脏器,并进入外周血液,而正常血细胞的制造被明显抑制。癌细胞的侵袭转移是肿瘤患者主要致死原因,而组织浸润和转移高度依赖细胞外基质的改变和细胞间的相互作用,其中涉及细胞表面分子的糖基化[1]。糖基化异常可导致细胞的识别和黏附功能障碍,在成熟细胞中如果出现了早期的分化抗原,某些糖基转移酶的活性升高或降低,就会产生癌变,因此一些糖基转移酶被视为癌变的重要标志[2]。β1,3N乙酰氨基葡萄糖转移酶(β3GnTs)将UDPGlcNAc中的GlcNAc通过β1,3连接催化到Galβ1,4Glc(NAc)的Gal上,在N聚糖中通常由β1,4半乳糖基转移酶基因家族的重要成员GalT4后继催化。肿瘤细胞中聚乙酰半乳糖胺及功能性寡聚糖sialylLex,diLex 增多,促进肿瘤的浸润转移。最近,有学者报道,β3GnT2和β3GnT8能够在体外形成异二聚体,此复合物的催化活性比两者各自的酶活性显著增强[3]。本试验采用RTPCR分别检测8种白血病细胞株和不同白血病患者骨髓有核细胞中β3GalT7/GnT8和β3GnT2的mRNA表达,并以正常成人骨髓标本为对照,进一步揭示β3GnT2和β3GnT8在人体内骨髓有核细胞中的表达情况,希望为白血病的早期诊断和治疗以及研究糖基化与肿瘤之间的关系提供新思路。
1 材料与方法
1.1 材
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