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脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关基因细胞间黏附分子表
脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后凋亡相关基因细胞间黏附分子表
作者：苏云明 张学会 李环 李卉 孟妍
【摘要】 目的观察脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用，进一步探讨其作用机制。方法Wistar大鼠雄性70只，按照体重随机分为7组，每组10只。即脑心康片高剂量组、中剂量组、低剂量组，尼莫地平组，银杏叶片组，模型组和假手术组。各组均连续灌胃给药7 d（模型组和假手术组予等体积生理盐水）。末次给药30 min后，除假手术组外各组采用大鼠大脑中动脉线栓法制备不完全脑缺血模型，观察脑心康片给药前后大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠神经功能缺损导致的行为学变化；免疫组织化学法检测脑心康片对脑缺血后24，48，72 h脑组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）蛋白表达的影响。结果脑心康片能明显改善脑缺血大鼠的神经功能缺损症状，抑制ICAM-1蛋白的表达。结论脑心康片对脑缺血具有保护作用，遵循一定的时-效关系和量-效关系，其机理可能与脑心康片通过抑制凋亡相关基因的表达，进而抑制神经元细胞凋亡有关。
【关键词】 脑心康片；脑缺血；再灌注损伤；细胞凋亡； 细胞间黏附分子-1
Abstract:ObjectiveTo study the protective effect of Naoxinkang-tablet on cerebral ischemia reperfusion injury in rats and its mechanism.MethodsThe model of incomplete cerebral ischemia were induced by occluding the middle cerebral artery occlusion (MCAO). The protein expression of ICAM-1 was immunohistochemical method at 24 h, 48 h and 72 h after cerebral ischemia.ResultsNaoxinkang-tablet could obviously improve detected by symptoms of the neurological deficit in cerebral ischemia rats, inhibit the expression of ICAM-1. ConclusionNoxinkang-tablet has protective effect on cerebral ischemia reperfusion injury in time and dose dependent manners by inhibiting ICAM-1 expression and anti-inflammation.
Key words:Naoxinkang-tablet；Cerebral Ischemia；Reperfusion injury；Cell Apoptosis； ICAM-1
脑血管疾病是神经系统的常见病、多发病，是目前引起人类死亡的三大疾病之一。缺血性脑卒中是多种原因引起的一种临床病理状态,其脑组织损害是产生临床征象的病理基础。在本病的预防、治疗和康复方面，中医药具有较为显著的疗效和优势。临床应用脑心康片治疗脑缺血，取得满意疗效［1］。本实验通过对大鼠脑神经损伤的行为学改变、凋亡相关基因ICAM-1蛋白表达的观察，探讨脑心康片对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其作用机制。现报道如下。
1 材料与仪器
1.1 动物
Wistar大鼠，雄性，体重（200±20）g，由黑龙江中医药大学实验动物中心提供，动物许可证号：黑动字大鼠自由进食、饮水，同等条件下饲养，手术前12 h禁食，不禁水。
1.2 药品与试剂
脑心康片由蝙蝠葛酚性碱50%、水蛭素50%组成，黑龙江中医药大学实验中心制备；尼莫地平片，天津中央药业有限公司生产，批号0701001；银杏叶片，唐山荣大药业有限公司生产，批号050304。Rabbit Anti CD54（ICAM-1）（BA2189），稀释度：1∶100（武汉博士德生物工程有限公司）。HRP标记的链霉卵白素-亲和素SP试剂盒、 S/P三步法检测试剂盒（批、PV6001二步法检测试剂盒（批号1360）、兔抗山羊IgG/HRP（批号C0206）、 山羊抗鼠IgG/HRP（批号N045036）、 DAB显色试剂盒 （批，均有北京中杉金桥生物技术有限公司生产。
1.3 仪器
生物组织摊烤片机、生物组织包埋机（湖北孝感）；电热鼓风干燥箱（上海福玛）；光学显微镜（Olympus Ja
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