葛根素衍生物4ac混悬液及其纳米粒在Beagle犬体内药代动力学研.docVIP

葛根素衍生物4ac混悬液及其纳米粒在Beagle犬体内药代动力学研 　 作者：郭东艳 陈士林 杨大坚 【摘要】 　　目的比较葛根素衍生物4ac混悬液及其纳米粒在Beagle犬体内的生物利用度。方法分别于给药后不同时间取血，高效液相色谱（HPLC）法测定血清中葛根素衍生物4ac的血药浓度，应用3P97药动学统计软件对血药浓度数据拟合。结果葛根素衍生物4ac混悬液及其纳米粒在Beagle犬体内过程均符合二室开放模型。结论葛根素衍生物4ac纳米粒较葛根素衍生物4ac混悬液相比能明显提高在Beagle犬体内的生物利用度。 【关键词】 葛根素衍生物4ac； 药物动力学； 高效液相色谱 　　Abstract：ObjectiveTo study the pharmacokinetics of suspension and nanopaticles in beagle dogs.MethodsBlood was collected at different time. The plasma concentration of the derivatives-4ac was determined by HPLC. The compartment model was calculated with 3p97 program and the pharmacokinetic parameters were compared with SPSS program. ResultsThe suspension and nanopaticles of derivatives-4ac could be fitted to two-compartment model in beagle dogs. ConclusionNanopaticle of derivatives-4ac can obviously improve the bioavailability in beagle dogs. 　　Key words：Derivatives-4ac； Pharmacokinetics ； HPLC 　　葛根素是葛根心脑血管活性的主要物质基础［1，2］，临床上常用于治疗冠心病、心绞痛及脑血栓等疾病［3～5］。实验证明，犬口服葛根素的生物利用度低，其绝对生物利用度约为3%，大部分以原形从粪便中排出。为了提高葛根素的生物利用度，制备了葛根素的衍生物4ac及其衍生物4ac的纳米粒。本实验旨在采用高效液相色谱法，测定葛根素衍生物4ac混悬液及其纳米粒在Beagle犬体内的生物利用度。 　　1 器材 　　1.1 药品与试剂葛根素衍生物4ac由香港理工大学杨大坚教授提供，经HPLC法测定含量均在98%以上。葛根素衍生物4ac混悬液为4ac加蒸馏水制成的混悬型水针剂；葛根素衍生物4ac纳米粒冻干针剂（4ac-PLA-NP，香港理工大学中药研究所自制）为衍生物4ac经溶剂挥发法制备的纳米胶体溶液经冷冻干燥制成的冻干粉针剂。 乙腈、甲醇均为HPLC级，水为重蒸馏水。 　　1.2 仪器与色谱条件Agillent1100高效液相色谱仪，DAD二极管阵列检测器，HP1100色谱工作站；Agillent XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；预柱为Agillent XDB-C18柱（4.6 mm×12.5 mm ，5 μm）；梯度洗脱：0 min 乙腈∶水（10∶90） 0.7ml/min；15 min乙腈：水（60∶40）0.7 ml/min；20 min 乙腈∶水（70∶30） 0.7 ml/min；30 min 乙腈∶水（100∶0） 0.7 ml/min；柱温为室温；检测波长为250 nm。 　　1.3 动物Beagle犬，体重（10±0.1）kg，雌雄兼用，由广州医药工业研究院Beagle犬培育中心供应。 　　2 方法与结果 　　2.1 葛根素衍生物4ac纳米粒（4ac-PLA-NP)的制备称取聚乳酸100 mg，4ac30 mg，卵磷脂0.2 ml（预先用二氯甲烷配成25％的溶液），加入1 ml二氯甲烷中溶解，作为有机相；另取普流罗尼克68（F-68）300 mg溶于蒸馏水中，作为连续相；将有机相加入连续相中，搅拌除去有机溶剂即得。 　　2.2 样品采集取Beagle犬6只，随机分为两组，每组3只，实验前禁食12 h， 4ac混悬水针剂、4ac-PLA-NP冻干针剂分别按含4ac 6 mg/kg静脉注射给药，于给药后0，0.083，0.25，0.5，1.0，3.0，6.0，12，24， 48，72，96，144 h取血，静置30 min后离心，取上层血清备用。 　　2.3 样品处理精密吸取0.5 ml血清，加入甲醇2.0 ml，旋涡振荡1 min，离心