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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶三种测定方法比较 　摘　要：目的：探讨检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）酶活的可靠方法。方法：选取190例临床标本为检测标本，分别采用定量比值法、NBT定量法和酶活测定法检测G6PD酶活，比较三种方法测定结果。结果：使用三种不同的方法检测G6PD缺乏型，总检出率分别为5.26%、5.26%和5.78%。其中，男性人群中G6PD缺乏检出率为6.93%，女性人群检出率为3.37%。结论：NBT定量法具有简便快捷，同时准确性高等优点，可对高发地区进行G6PD缺乏症的大规模筛查。 论文代写 关键词：G6PD；定量比值法；NBT定量法；酶活测定法 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（Glucose-6-phosphate dehydrogenase，简称为G6PD）是催化磷酸戊糖途径第一步反应的关键酶，催化6-磷酸葡萄糖脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，参与了维持细胞内谷胱甘肽的还原性[1]。由G6PD活性降低所引起的G6PD缺乏症（简称G6PD缺乏症）是世界上最常见的单基因遗传病之一，属于X-连锁不完全显性遗传。全世界约有4亿多人罹患此病，临床上主要表现为慢性非球形细胞溶血性贫血、蚕豆病、新生儿黄疸以及食物、药物或感染诱发的溶血性贫血等，其分子基础是G6PD基因突变[2]。G6PD缺乏症导致细胞内的还原力降低，红细胞不能抵抗氧化损伤而遭受破坏，引起溶血性贫血[3]。我国是本病的高发区之一，呈南高北低的分布特点，尤其是广东、广西、海南等地区。目前，测定G6PD酶的方法有：高铁血红蛋白还原试验、G6PD酶活性测定、G6PD荧光斑点试验。为快速获得G6PD酶活的准确信息，采用改良的G6PD定量比值法和G6PD酶活性测定法进行对比试验，现报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料：选取医院门诊血标本共190例，其中成年男性血标本101例，女性成年血标本89例。 毕业论文 1.2 试剂与方法：血样先用生理盐水洗涤2次。①改良G6PD /6PGD定量比值法采用广州米基科技贸易发展有限公司提供的试剂盒，按照试剂盒说明书操作，分光光度计比色；②G6PD酶活性测定采用世界卫生组织于1967年公布的标准测定方法进行测定；③硝基四氮唑蓝法（NBT法）。 1.3 参考范围：①WHO推荐的Zinkham法，其正常值为（12.1±2.09）IU/gHb；②NBT定量法，其正常值为13.1～30.0 NBT单位；③G6PD /6PGD比值法，其正常值为：G6PD /6PGD≥0.98（新生儿：≥1.09）。 论文代写 2 结果 2.1 三种方法的检测结果：应用定量比值法、NBT定量法和酶活测定法筛查G6PD缺乏症，三种方法的总检出率分别为5.26%、5.26%和5.78%。定量比值法和NBT定量法呈现高度的一致性。男性人群中定量比值法和NBT定量法检出率均为6.93%，而酶活测定法的检出率偏低，为5.94%。女性人群中定量比值法和NBT定量法检出率均为3.37%，而酶活测定法的检出率为5.61%。详见表1。 论文代写 表1 三种G6PD测定方法阳性检出率比较 方法 例数 阳性（例） 阳性率（%） 男 女 男 女 男 女 定量比值法 101 89 7 毕业论文 3 6.93 3.37 NBT定量法 101 89 论文代写 7 3 6.93 毕业论文 3.37 酶活测定法 101 论文代写 89 6 5 5.94 毕业论文 5.61 2.2 G6PD缺乏症在不同年龄段中的分布情况：在60岁以下人群中，20～30岁中的G6PD缺乏症病例最多，见图1。在所检测的50例60岁以上人群中未发现G6PD缺乏症患者，详见表2。 图1 不同年龄段人群中G6PD缺乏症的分布情况 表2 G6PD活性同年龄间的关系 方法 论文代写 例数 阳性（例） 阳性率（%） ＜60岁 ≥60岁 ＜60岁 ≥60岁 毕业论文 ＜60岁 ≥60岁 定量比值法 140 毕业论文 50 10 0 7.1 0 NBT定量法 140 50 10 0 毕业论文 7.1 0 酶活测定法 140 50 11 0 7.85 论文代写 0 为确定NBT定量法和酶活测定法的测定值是否有相关性，我们将测定的相关参数进行比较。WHO标准酶活测定法数值OD650， NBT定量法数值OD340， 将两组数据进行相关性测试。结果