蒙药索布如·札特巴提取物抗氧化活性探究.docVIP

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蒙药索布如·札特巴提取物抗氧化活性探究

蒙药索布如·札特巴提取物抗氧化活性探究   作者:敖恩宝力格,王金妞,邰丽华 【摘要】   目的研究蒙药索布如·札特巴的抗氧化作用。方法采用无水乙醇和蒸馏水分别对蒙药索布如·札特巴进行超声波提取,检测其提取物对于二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基的清除作用,以及对β- 胡萝卜素-亚油酸氧化体系的抑制作用。结果索布如·札特巴乙醇提物和水提取物对DPPH自由基有较好的清除作用,其达到50%清除率所需浓度IC50值分别为0.8 g/L和1.2 g/L;而且对β- 胡萝卜素-亚油酸氧化体系有明显的抑制作用,其IC50值分别为1.1 g/L和1.5 g/L。结论索布如·札特的乙醇提取物及水提取物具有抗氧化活性,80%乙醇提取物的抗氧化作用明显高于水提取物。 【关键词】 蒙药; 索布如·札特巴; 抗氧化性 蒙药索布如·札特巴是由石榴、豆蔻、广枣等8味蒙药材组成。主要功能是祛寒、除湿;用于痰、寒、气三型的心脏病的治疗[1],但迄今未见对其药理学方面的研究报道。 在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种自由基和活性氧,过多的活性氧与自由基通过损伤生物大分子,破坏细胞的结构和功能,促使疾病的发生与发展。研究发现,氧自由基与衰老、肿瘤、炎症、动脉硬化、肝和肺疾病等发生密切相关。抗氧化剂由于能清除人体的这些自由基而具有预防癌症、心血管疾病等疾病以及抗衰老的作用[2,3]。而人工合成的抗氧化剂如BHA等可导致DNA的损伤及恶性肿瘤的发生而其安全性受到质疑,因此高效、安全的天然抗氧化剂的提取及其应用无疑具有重要的意义。 蒙药是中华民族的瑰宝,历史悠久,在治疗疾病中发挥了独具特色的作用,但就其开发利用来讲,还比较落后。本文旨在通过测定蒙药索布如·札特巴抗氧化活性,为合理地开发利用这一宝贵的民族药物提供参考,并为开发天然抗氧化剂提供新的实验依据。   1 材料与仪器 蒙药索布如·札特巴由内蒙古中蒙医院提供。二苯代苦味酰肼(DPPH)自由基、β-胡萝卜素、亚油酸由美国sigma公司提供。2,6- 二叔丁基对甲酚(BHT)和抗坏血酸(Vc),无水乙醇,吐温40,氯仿等均为国产分析纯试剂。实验用水为二次石英亚沸蒸馏水。主要仪器有721型分光光度计、KQ3200V型超声波清洗器、FA2104N电子天平等。   2 方法   2.1 提取方法准确称取样品5.00 g于100 ml锥形瓶中,加入80%浓度的乙醇(或蒸馏水)50 ml,浸泡6 h,超声辅助提取(12 kHz,10 min),过滤,滤液用冷冻干燥仪干燥,称重,然后用浓度为10%的DMSO(dimethylsulfoxide)溶液使其溶解并用蒸馏水稀释至一定体积。   2.2 DPPH自由基的清除活性的测定DPPH自由基溶解于无水乙醇配成0.05 mmol/L的溶液。将0.1 ml不同浓度的蒙药提取物溶液加入4 ml DPPH溶液中,迅速混匀,在黑暗的环境中放置60 min后在517 nm 处测定溶液的吸光度。以抗坏血酸为对照。样品清除自由基的能力由下面的公式得出:抗氧化率(%)=〔(Ac-As)/Ac〕×100%。式中Ac及As为60 min后空白及待测样的吸光值。   2.3 β- 胡萝卜素抗氧化率的测定将0.15 mg β- 胡萝卜素溶解于15 ml氯仿,加入30 mg亚油酸和200 mg吐温40,然后于50 ℃旋转真空干燥。加入75 ml无氧蒸馏水,于超声波中形成乳化液。取0.1 ml样品乙醇液与5 ml乳化液于试管中混合,以不加提取物样品的等量乙醇代替与乳化液混合作为空白样。在45 ℃保温,于波长为460 nm处测定吸光度。同时采用BHT进行对照实验。抗氧化率用下式进行计算。 抗氧化率(%) = 100(△C-△S)/△C 。式中, △C =〔ln(Ac0/Ac60)/60〕;△S =〔ln(As0/As60)/60〕;△C为对照吸光值的降低率,△S为样品吸光值的降低率;Ac0与As0分别为t = 0 min时对照与样品的吸光度;Ac60与As60分别为t = 60 min时对照与样品的吸光度。    3 结果   3.1 DPPH自由基清除活性分析DPPH自由基是比较稳定的有机物自由基,广泛应用于测定纯抗氧化剂或植物提取物的体外抗氧化活性[4~6]。本研究以抗坏血酸为参照,利用该法对比了两种提取物的DPPH自由基清除效果。如图1所示,抗坏血酸及索布如·札特巴80%乙醇提取物和水提取物的DPPH自由基清除能力随其浓度升高而显著增强,且80%乙醇提取物的抗氧化作用明显强于水提取物。在本试验条件下,抗坏血酸的半数抑制浓度(IC50)约为0.4 g/L,索布如·札特巴80%乙醇提取物的IC50约为0.8 g/L,而水提取物的IC50约为1.2 g/L,可见索布如·札特巴的乙醇及水提取物具有较好的

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