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蒲公英多糖抗疲劳作用探究
蒲公英多糖抗疲劳作用探究
作者:杨晓杰 付学鹏 刘泽东
【摘要】 目的就蒲公英多糖对小鼠抗疲劳作用效果及有效剂量进行研究。方法将蒲公英多糖分3个剂量组即0.2,0.5,0.8 g/kg 给小鼠灌胃,对照组为蒸馏水。21 d 后小鼠游泳造成疲劳,测定小鼠力竭游泳时间、血清尿素氮及肝糖原等指标。结果小鼠负重游泳时间明显延长,血尿素氮显著下降,肝糖原的含量明显升高。结论 蒲公英多糖的各个剂量组能有效提高小鼠的抗疲劳能力,其中多糖浓度0.5 g/kg剂量组效果最好。
【关键词】 蒲公英多糖 小鼠 抗疲劳
蒲公英为蒲公英属Taraxacum植物的统称,是常用的抗菌中草药,在动物医学和人类医疗保健等方面的应用源远流长。蒲公英适应性广,抗逆性强,抗寒又耐热,对光照要求不严,抗旱、抗涝能力较强,可在各种类型的土壤条件下生长,有较强的环境适应能力[1]。蒲公英属植物均可以药用,有清热解毒、消痈散结之功能,具有抗病原微生物、提高免疫力、利胆保肝、抗自由基延缓皮肤衰老等功效[2]。近年,随着对其开发利用价值的深入研究,特别是其医疗保健功能的被确认,引起了医学专家和营养学专家的关注。我国对多糖的研究,始于20世纪70年代,虽然起步较晚,但发展很快,到目前为止,人们发现多糖在抗肿瘤、抗病毒、防治心血管疾病、抗衰老以及增加免疫性等方面有独特的生物活性。但到目前为止,只有一些真菌多糖和为数不多的种子植物多糖被用于临床[3]。
关于蒲公英多糖提取及抗肿瘤、抗突变、抗氧化等生物活性的研究仅见作者的几篇报道[4,5]。本实验就蒲公英多糖的抗疲劳作用特性进行了实验研究,以期对蒲公英活性多糖资源的开发利用提供有价值的实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料实验用蒲公英为采自齐齐哈尔市区的东北蒲公英。
1.2 多糖的提取按照文献[4]的方法制得。
1.3 动物2~3月龄,昆明种雄性健康小鼠,共48只,体重(25±3)g,由吉林大学实验动物研究中心提供。动物饲料,由吉林大学实验动物研究中心提供。
1.4 方法
1.4.1 灌胃动物模型将实验动物小鼠分为4个组,即蒲公英多糖高、中、低剂量组(分别灌胃蒲公英多糖水溶液0.8,0.5,0.2 g/kg)和对照组,每组12只小鼠,采用灌胃法,每天以20 ml/kg·bw的容量给小鼠灌胃不同剂量的多糖溶液,对照组给予等量蒸馏水。1次/d,连续21 d。第22天进行各项抗疲劳指标的测定。
1.4.2 运动模型对照组与实验组于灌胃第15天开始进行适应性游泳训练,游泳时间由10 min/d开始,每天递增5 min至第20天,力竭判断标准为按小鼠体重5%负重游泳至小鼠沉入水底8 s不浮起,捞出后无法完成翻正反射。
1.4.3 测试指标与方法
力竭游泳时间:末次给小鼠受试剂30 min后,采用负重方式于鼠尾系一质量为小鼠体重5%的铅块,将小鼠置于水深30 cm的游泳箱中,水的温度控制在30℃左右。强迫游泳至力竭(沉入水底8 s不动为止),记录游泳时间。
血清尿素氮的测定:①血清的制备:末次给小鼠受试剂30 min后,将小鼠不负重置于水深30 cm的游泳箱中,水的温度控制在30℃左右,游泳90 min,休息30 min后立刻尾部采血,采血大约0.5 ml(不加抗凝剂)。置4℃冰箱约3 h,血凝固后2 500 r/min离心15 min,取血清并测定血清尿素氮值。②尿素氮测定方法:按文献[6]方法测定。
肝糖原的测定:①肝糖原的提取:末次给小鼠受试剂30 min后,立刻脱颈处死,取肝脏,迅速以滤纸吸去附着的血液。称取约1 g,置乳钵中,加洗净细砂少许及10%三氯乙酸1 ml,研磨。再加5%三氯乙酸2 ml,继续研磨,至肝脏组织已经充分磨成肉糜状为止。然后以2 500 r/min离心10 min。将上清液转入另一离心管并量取体积,加入同体积的95%乙醇,混合后,静置10 min。此时糖原成絮状沉淀析出。沉淀溶液以2 500 r/min离心10 min。弃去上清液,并将离心管倒置于滤纸上2 min。沉淀内加入蒸馏水1 ml,用玻璃棒搅拌沉淀至溶解。②肝糖原的测定:按文献[7]方法蒽酮-浓硫酸法测定肝糖原含量,每组重复3次,取平均值。
1.4.4 数据处理用Sigmaplot scientific Graphing system软件对数据进行处理与分析。
2 结果
2.1 力竭游泳时间末次给小鼠受试剂30 min后,采用负重方式于鼠尾系一质量为小鼠体重5%的铅块,将每组小鼠强迫游泳至力竭(沉入水底8 s不动为止),记录游泳时间。见表1。
表1 力竭游泳时间
组别浓度C/g·kg-1平均时间t/min对照0.073.74蒲公英多糖低剂量0.281.87蒲公英多糖中剂量0.5103.16*蒲公英多糖高剂量0.89
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