微杆菌ZD-M2的分离及其脱硫特性的分析研究.pdf

摘l 摘要 燃料油燃烧引起的硫氧化物的排放是形成酸雨的主要原因。低含硫矿物燃料 的稀缺、高品质清洁燃料油的需求和日益严格的控制标准迫切需要开发燃烧前深 度脱硫技术。生物脱硫(BDS)具有选择性高、反应条件温和、设备投资和操作费 用低等优点，是可能取代或补充传统的加氢催化脱硫法、实现燃料油深度脱硫最 sp．)ZD—M2展开，主要研究了该菌的脱硫特性以及在气升式反应器内的脱硫性能。 从不同污泥与堆煤土样中分离出七株菌株，均能专一地切断二苯并噻吩 株46h休止细胞和繁殖期生长细胞脱硫活性的比较，筛选出具有较高脱硫活力的 mmol-L。1 7．0，O．5 24和74菌株，并在生长温度30℃，pH DBT作为唯一硫源，以 甘油为碳源，用摇瓶培养法测定了它们的生长和脱硫曲线。两菌还能以燃料油中 的其他含硫有机化合物：噻吩、苯并噻吩、二苯硫醚和4，6一二甲基二苯并噻 吩为硫源生长，表现出较广的底物范围，具有较好的燃料浊生物脱硫工业应用前 景。系列实验结果显示24的各项脱硫特性均优于74，因此进一步的研究采用24 菌株。通过生理生化和16S rDNA的鉴定，28菌株属于微杆菌属，并命名为微杆 菌(Microbacterium sp．)ZD—M2，国内外未见该类属性的脱硫菌株的报道。 研究培养条件对该菌生长和脱硫的影响，发现该菌生长适宜的温度为30℃； 对环境pH变化有良好的耐受性，适宜的初始pH为6．5～9．5；有机氮源比无机 氮源更有利于细胞的生长，然而有机氮源对ZD．M2脱硫活性的表达有抑制作用， 以氯化铵为最佳氮源来生长的最佳浓度为1．0 g．L～；该菌能利用多种碳源和硫源 进行生长，但以甘油和DBT为最佳，最适甘油浓度为2．0窑·L～、DBT投加量为 0．2mmol，L-l。在水溶液和存在有机相的溶液中，ZD—M2的脱硫活性部较高，以 正十六烷为有机相时能提高菌株对DBT的脱硫活性，但活性持续时间只有9h， 较水溶液中的24 h短。而有机相和水相的不同配比也会影响ZD—M2降解DBT 的效率，通过实验得出两相的最佳配比为1：1，此时微生物的脱硫活性最高。 微杆菌ZD-M2的脱硫代谢途径基本上遵循“4s途径”，但同时发现另外两 种新产物2-甲氧基联苯和联苯，这两种产物能部分消除2-HBP对酶的抑制和对 细胞的毒害，从而更有利于生物脱硫。产物2-ILBP不仅对ZD-M2的生长有抑制 作用，对细胞脱硫酶的产生和脱硫酶的活性也有较强的抑制作用。在水溶液中当 2-HBP初始投加浓度达到0．1 mM时DBT就不再降解，此时降解率为25％左右， 而以正十六烷为有机相的加入能有效降低2-HBP的抑制作用，当2-HBP初始投 加浓度达到0．2mM时DBT降解率也有50％左右。初次尝试研究了微杆菌ZD．M2 镕要 的相关模型，说踢2-HBP的生成与细胞的生长是同步的。 在自行设计的气升式反应器中ZD．M2降解正十六烷中的DBT，在实验所选 的条件下，通气量为180L、h。。时，细菌的脱硫效果最好。休止细胞在生长介质(培 养基)和非生长介质(磷酸缓冲溶液和生理盐水)中具有几乎相同的脱硫活性。 在水溶液中菌体产生的2一HBP随休止细胞的浓度增大而增加，但是菌体的脱硫 活性即2-HBP的比生成速率却相反。在气升式反应器中的正十六烷一水溶液体系 也是如此。也就是说，在高细胞浓度条件下，单个细胞的脱硫能力由于传质速率 的影响不能得到充分的发挥。随着正十六烷中的DBT浓度增加，脱硫速率增大， rmnol-L～。 但高浓度DBT又会抑制脱硫活性，实验条件下最佳DBT浓度为5．7 根