分子光谱法的分析研究某些食用合成色素及药物及蛋白结合的反应机理.pdf

摘 要 摘 要 小分子配体与蛋白质相互作用的研究是化学生物学的重要研究内容。血清白蛋白是 血浆中含量最丰富的蛋白质，可以广泛地和许多内源性及外源性物质结合，在体内起着 储存和转运作用。研究药物、毒性物质等小分子配体与血清白蛋白的相互作用，在药代 动力学和毒理学上具有重要意义。该领域己成为从事生命科学、化学和临床医学科研工 作者共同关注的课题之一。本文利用分子光谱法对食用合成色素、药物与血清白蛋白间 的作用机理进行了研究探讨，共分以下五部分： 第一章：综述了荧光光谱法研究小分子配体与蛋白质相互作用的研究内容，并介绍 了两种配体与蛋白质结合的相互竞争的条件及研究进展，在此基础上提出本文的选题思 路和研究内容，共引用参考文献 52 篇。 第二章：荧光光谱法研究食用合成色素与牛血清白蛋白(BSA) 的相互作用。在 pH=7.40 Tris–HCl缓冲溶液中，柠檬黄(TTZ)、日落黄(SY)及赤藓红(ETS)三种食用合成 色素与BSA形成非共价复合物，导致BSA 的内源性荧光发生静态猝灭；它们与BSA 的结 合能力依次为：ETS TTZ SY ，体系的Hill系数稍大于1。计算体系热力学参数表明三 种食用色素与BSA结合的作用力主要是氢键和范德华力。应用标记竞争试验确定了三种 食用合成色素在BSA 中的结合位置主要位于亚结构域ⅡA(位点 Ⅰ) ，并根据Förster偶极- 偶极非辐射能量转移机理计算了食用合成色素与BSA 的结合距离r值均小于7 nm 。 第三章：荧光光谱法研究食用合成色素对诺氟沙星(NFLX)与牛血清白蛋白结合的 影响。食用合成色素TTZ、SY和ETS及NFLX都能猝灭牛血清白蛋白(BSA)的荧光。NFLX 与BSA 间的作用力主要是静电作用力，结合位置也主要位于亚结构域ⅡA(位点 Ⅰ) 。食 用合成色素与NFLX共存时发生对BSA结合位点的竞争，从而造成游离型NFLX含量增 加，药效改变。根据Förster非辐射能量转移理论，研究了食用合成色素对NFLX与BSA 之间的结合距离r 的影响，结果表明色素的存在使r值增大。 第四章：荧光光谱法研究食用合成色素对盐酸环丙沙星(CPFX)与牛血清白蛋白结 合的影响。CPFX与BSA 间的作用力主要是静电作用力，结合位置主要位于位点 Ⅰ即亚 结构域ⅡA 。食用合成色素的存在影响CPFX与BSA之间的结合常数和结合距离，并且 这种影响与食用合成色素的浓度和结合力有关，从而致使血液中游离的CPFX浓度增加， I 摘 要 药效改变。 第五章：荧光光谱法研究不同温度时头孢噻肟钠(CTX)和氯霉素(CHL)与牛血清白 蛋白的相互作用。在 pH 7.40 Tris–HCl 缓冲溶液中，CTX、CHL 对 BSA 荧光的猝灭反 应皆为静态猝灭过程。标记竞争实验表明 CTX、CHL 在 BSA 中的结合位置主要位于位 点Ⅰ。在 BSA–CTX(或 BSA–CHL)体系中再加入 CHL(或 CTX)时，可使BSA 的荧光进 一步猝灭，结合常数减小，且三元体系的 Hill 系数均小于 1，表明一种药物的存在将影 响另一种药物与 BSA 的结合，两种药物之间具有负协同作用。并用热力学参数确定了 药物与 BSA 之间主要为静电作用力。 关键词 食用合成色素 药物 牛血清白蛋白 荧光光谱 相互作用 II Abstract Abstract The interactions between small molecules and protein are important for chemistry biology investigation. Serum albumin, the most abundant carrier protein in blood pla