超高效液相色谱法测定龙胆药材中獐芽菜苦苷及龙胆苦苷.docVIP

超高效液相色谱法测定龙胆药材中獐芽菜苦苷及龙胆苦苷 　 作者：曹悦，左代英，吴晓兰，刘敬武，孙启时 【摘要】 　　目的建立超高效液相色谱（UPLC）法测定龙胆药材中活性成分的方法。方法采用L9（34）正交表安排实验，确定最佳提取条件。色谱柱：Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm, 1.7 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（V∶V = 5.5∶94.5），流速0.80 ml/min；检测波长235,270 nm；柱温为40℃。结果獐芽菜苦苷、龙胆苦苷分别在0.154 8～1.858 0 mg/ml，0.322～5.152mg/ml范围内呈良好的线性关系，平均回收率分别为102.09%，RSD=1.68％（n=6）；103.80%，RSD=1.11％（n=6）。结论采用UPLC法控制龙胆质量，操作简单,结果准确，方法可行。 【关键词】 龙胆 超高效液相色谱 獐芽菜苦苷 龙胆苦苷 　　Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of swertiamarin and gentiopicroside in root of Gentiana scabra Bge.by UPLC.MethodsBy L9（34）orthogonal design, an optimal condition was confirmed. The separation was performed on Shimadzu C18（3.0 mm×75 mm,1.7μm） column, the mobile phase was Acetonitrile-0.1% Phosphorylation（V∶V = 5.5∶94.5）. The flow rate was 0.8 ml/min, the detection wavelength was 235nm, 270nm, and the column temperature was 40℃.ResultsThis method had good linearity in the range of 0.322～5.152mg/ml,and the average recovery was102.09 % with RSD of 1.68%for swertiamarin. It had good linearity in the range of 0.1548～1.858 mg/ml ,and the average recovery was 103.80% with RSD of 1.11%for gentiopicroside.ConclusionThis method is simple , accurate , and suitable for the quality control of root of Gentiana scabra Bge.by UPLC. 　　Key words：Radix Gentiana Scabra Bge.; UPLC; Swertiamarin; Gentiopicroside 　　龙胆为龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica Kitag．，龙胆Gentiana scabra Bge．，三花龙胆Gentiana triflora Pall．或坚龙胆Gentiana rigescens Franch．的干燥根及根茎。具有清热燥湿，泻肝胆火的作用。用于湿热黄疸，阴肿阴痒，带下，强中，湿疹瘙痒，目赤，耳聋，胁痛，口苦，惊风抽搐［1］。龙胆的主要有效成分为环烯醚萜类化合物，有龙胆苦苷（Gentiopicroside）、獐牙菜苦苷（Swertiamarin）及獐牙菜苷（Sweroside）等,这类物质也是其苦味的物质基础［2］。目前采用常规液相分析时一般都需要较长的分析时间，而超高效液相色谱(UPLC)技术的应用，是我们在满足有效分离样品的同时，极大地缩短了分析时间，有效地提高了工作效率，节约了成本。而本文就是采用UPLC建立了一种快速、准确控制龙胆质量的方法。 　　1 仪器与试剂 　　岛津-UPLC超高效液相色谱仪，LC-solution色谱工作站。獐芽菜苦苷对照品（北京中西远大科技有限公司，批号070316 纯度99.06%），龙胆苦苷对照品（中国生物制品检定所，批号110770-200510），磷酸为分析纯，其余试剂均为色谱纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 提取工艺的考察以獐芽菜苦苷和龙胆苦苷为检测指标，选取提取溶剂、提取方法、提取时间3个因素，每个因素3个水平，采用L9（34）正交表进行实验，按“2.4”项制备样品溶液，按“2.5”项条件进行测定。综