靶向survivin利用RNA干扰技术影响云南个旧肺鳞癌细胞株YTMLC凋亡.docVIP

靶向survivin利用RNA干扰技术影响云南个旧肺鳞癌细胞株YTMLC凋亡 　 作者：蒋鸿超 ，孙茂盛，赵丹，吕琳，孙强明，李鸿钧 【摘要】 　　目的 检测云南个旧肺鳞癌细胞株YTMLC细胞内源凋亡抑制因子survivin基因的表达以及促进YTMLC细胞凋亡的情况。方法 构建和转染重组质粒pshRNAsurvivin1和pshRNAsurvivin2至YTMLC细胞株,通过免疫荧光和半定量RTPCR 检测survivin 蛋白表达及mRNA 转录水平的变化，并通过流式细胞仪使用PIAnnexin V双染法检测YTMLC细胞株的凋亡。结果 构建的2种重组质粒pshRNAsurvivin1和pshRNAsurvivin 2均能明显抑制survivin基因的表达;应用免疫荧光检测survivin基因的表达,转染重组质粒pshRNAsurvivin1和pshRNAsurvivin2的实验组survivin荧光强度明显低于转染空载体pGE1和pshRNAnegative非特异对照质粒;通过半定量RTPCR 检测到survivin基因mRNA转录明显减少,抑制率为80.60%和70.09%;通过PI Annexin V 双染法检测YTMLC细胞的凋亡分别达（33.42±2.42）%（Plt;0.01）和（20.09±1.32）%（Plt;0.01）。结论