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  • 2017-09-13 发布于福建
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DCSIGN特异性适配子筛选及鉴定

DCSIGN特异性适配子筛选及鉴定  作者:陈芳, 曾洁, 孙平, 潘勤, 章晓联 【摘要】   目的: 筛选高特异性、 高亲合力结合DCSIGN的单链DNA适配子, 为开发抗HIV、 HCV和结核杆菌感染的新型预防和治疗试剂奠定基础。 方法: 采用基于细胞表面展示的SELEX技术(TECSSELEX), 筛选出具有高亲合力结合DCSIGN的单链DNA(ssDNA)适配子; 运用流式细胞术(FCM)检测该适配子的亲合力; 对最高亲合力适配子库进行克隆和测序; ELISA和FCM方法检测单适配子ZD8与DCSIGN蛋白结合的剂量相关性; MTT法测定IC50观察适配子对细胞的毒性。 结果: 第14轮筛选的适配子库亲和力最高; DCSIGN抗体能抑制适配子结合表达DCSIGN蛋白的细胞; 第14轮库中筛选的单适配子ZD8 与DCSIGN蛋白的结合率呈剂量依赖性; 所筛选的单适配子对肝细胞几乎无毒性。结论: 成功筛选出DCSIGN蛋白的ssDNA适配子, 为防治HIV、 HCV和结核杆菌感染等DCSIGN相关性疾病, 提供新型预防和治疗的候选试剂和小分子药物。   AIM: To develop the high affinity DNA aptamers which can selectively recognize DCSIGN protein as pu

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