罗汉果蛋白酶的提取分离、特性及应用的分析研究.pdfVIP

中文摘要 本论文分别运用文献计量的方法对罗汉果和蛋白酶在国内的研究与进展进 行了分析，阐明了罗汉果和蛋白酶的研究对国民经济的发展所起的重大作用，并 指出了现有研究工作的不足之处和今后的发展方向。 论文首次对从鲜罗汉果中发现的一种新型植物蛋白酶一罗汉果蛋白酶展开 研究，通过对其提取分离工艺的探讨，理化性质和催化动力学的研究，及应用其 进行大豆蛋白水解研究，获得了该蛋白酶的各项性能参数和许多有关应用方面的 有价值信息，为今后进一步开展该酶的研究与改造、生产与应用奠定了理论基础。 在提取分离过程中，我们依次用乙醇沉淀法、单宁沉淀法和超滤法对罗汉果 蛋向酶进行提取工艺研究。利用DEAE—sepharoseCL～6B离子交换层析，对罗汉 果蛋白酶进行了进一步纯化。同时对纯化酶进行了部分性质研究。 实验结果表明，超滤提取法得到的产物品质最好，活性最高。纯化产物通过 等电聚焦电泳检查，只显示一条带。酶的比活力为达到4475．9×104U／g，与超滤 法提取的粗酶相比，纯化倍数为1．87，酶活力回收率为5．94％。 罗汉果蛋白酶的等电点为DH8．55；最适反应pH为7．2和10．8，最适反应温 内，酶活性几乎保持不变；对酪蛋白的K．值为0．0729mmol／L；该蛋白酶活性可 被EDTA、半胱氨酸激活；HgCl。对罗汉果蛋白酶具有抑制作用。 罗汉果蛋白酶可应用于水解大豆蛋白制备大豆肽。水解的最佳条件是酶和底 物之比为5．O％、温度60℃、pH值为9．0、大豆蛋白浓度5％，水解时间为1h。 关键词： 罗汉果蛋白酶提取分离性质水解大豆肽 vIII ABSTRACT Inthis thedocumentsofsiraitia and paper grosvenoriplantproteinase published intherecent inChinawere themethodsofdocument years analyzedbyapplying thedocumental fieldsand meterology．Byevaluating types，publishingyears，subject studies siraitia mad weresummarizedand so onthe on，the grosvenoriproteinase plant also out thecurrentstatusand directionforlaterresearchwere pointed developing wasfirst andstudiedin Anew insiraitia discoveried plantenzyme grosvenorii this the studiesontheconditionsof experiments，the extractingenzyme， paper,During thecharactersof and kinetic of