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性别对超重人群皮下脂肪脂联素mRNA表达影响 　【摘要】 　　目的 探讨性别因素对超重人群皮下（SC）脂肪组织脂联素（APN）mRNA（SA mRNA）表达的影响。方法 选取22例男性超重患者〔体质量指数（BMI）≥27 kg/m2,OBM组〕、26例女性超重（BMI≥25 kg/m2,OBF组）以及40例正常体质量者（BMIlt;25 kg/m2,男性为NM组，女性为NF组），实时荧光定量PCR测定腹部SA mRNA的表达，同时测定血糖\血清胆固醇(TC)、甘油三酯（TG）、胰岛素水平等生化指标。结果 在超重人群中，OBF组的SA mRNA明显高于OBM组（Plt;0.05）；但OBF组SA mRNA仍低于NM组（Plt;0.01）。SA mRNA与BMI、腰臀比(WHR)、TC和TG水平呈负相关(r=-0.290,r=-0.178,r=-0.247,r=-0.178,Plt;0.05)。逐步回归分析以SA mRNA为因变量，BMI,WHR,TC,TG以及HOMA等作为自变量，结果显示，在整体人群中，BMI和TC入选(R2=0.030,Plt;0.05,R2=0.169,Plt;0.01)。在OBM组中，只有TC入选(R2=0.274,Plt;0.01)。结论 女性超重人群SA mRNA高于超重男性，提示SA mRNA的性别差异主要表现在超重人群中，体重适中者则无此关联。 【关键词】 脂联素；超重；性别因素；脂肪组织；基因表达 　　脂肪组织不仅是一个能量储存器官，也是人体内一个重要的内分泌器官〔1〕，可以分泌包括脂联素（APN）在内的多种活性蛋白因子，发挥不同的生物代谢功能。研究表明，APN具有抗动脉粥样硬化、抗胰岛素抵抗和抗炎等作用，在保护肥胖相关疾病，如心血管疾病和糖尿病中发挥重要作用〔2〕。本研究选取2004年9月至2006年2月在天津市公安医院开腹手术的超重患者，检测其皮下（SC）脂肪组织APN mRNA（SA mRNA）的表达，并测定一系列相关代谢指标的水平，进一步探讨SA mRNA表达水平与性别之间的关系。 　　1 材料与方法 　　1.1 对象 　　脂肪组织来自腹部择期手术的88例患者，其中，超重人群48例，女性超重（OBF组）患者26例，平均年龄（50.65±9.39）岁，男性超重（OBM组）患者22例，平均年龄（48.09±10.77）岁；正常体质量40例，女性（NF组）22例，平均年龄（43.45±5.81）岁，男性（NF组）18例，平均年龄（49.78±6.48）岁。超重人群判断依据体质量指数（BMI），根据亚洲国家大规模临床研究的结论，男性BMI≥27 kg/m2或女性BMI≥25 kg/m2视为超重。所有研究对象均无糖尿病、高血压、甲亢、Cushing综合征及其他内分泌代谢疾病，也无恶性肿瘤、心肾功能衰竭、严重肝脏疾患及其他严重全身性疾病患者；近期未曾服用减肥及其他影响脂肪代谢药物。 　　1.2 标本采集 　　测量体重、身高、血压、腰围、臀围，并计算BMI、腰臀比（WHR）。空腹取肘正中静脉血5 ml，取血前夜禁食12 h，禁水8 h，取血后分离血清，2 h内检测血糖，同批次检测其他生化指标：血浆葡萄糖、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及胰岛素，方法同前〔3〕。计算胰岛素抵抗指数（HOMAIR）=空腹血糖×空腹胰岛素/22.5。术中取SC（剑突与脐中点的腹白线处腹壁皮下）脂肪组织约2～3 g，立即放置液氮中冷冻，并移至-80℃保存。 　　1.3 实时荧光定量PCR扩增APN基因片段 　　提取SC脂肪组织总RNA，逆转录为cDNA，APN及管家基因βactin的上下游引物及Taq酶探针的引物见表1。反应体系：10× buffer 2.5 μl，10 mmol/L dNTP 2 μl，MgCl2 3 μl（3 mmol/L），APN正义链和反义链以及βactin正义链和反义链各2 μl，APN和βactin引物各1 μl，Taq DNA 聚合酶0.75 μl（3.75 IU），BSA 各0.25 μl，模板1 μl，灭菌双蒸水 10.5 μl。反应条件（Roche公司Lightcycler热循环仪）：95 ℃预变性5 min,95 ℃变性10 s，56 ℃（APN）或58℃（βactin）退火10 s，72℃延伸12 s，共40个循环。表1 RTPCR引物及探针（略） 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS13.0统计软件，数据以x±s表示，计量资料经正态性检验，组间比较应用单因素方差分析，两两比较使用LSD法；胰岛素和HOMAIR以自然对数转换值进行分析。采用Kendall′s taub秩相关分析。多元线性回归分析采用逐步回归法。 　　2 结 果 　　2.1 各组人群间一般情况