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抵抗素基因转染诱导肝性胰岛素抵抗细胞鉴定 　【摘要】 目的 将编码人抵抗素基因的pcDNA 3.1(+)真核表达载体在HepG2肝癌细胞中进行稳定转染，以建立抵抗素诱导的肝性胰岛素抵抗细胞模型。方法 实验分3组：HepG2细胞组;空质粒组;抵抗素基因转染组，通过免疫细胞化学和RTPCR方法进行抵抗素基因和蛋白表达鉴定，用微量化的葡萄糖氧化酶法检测细胞对葡萄糖的摄取作用。结果 免疫细胞化学染色结果表明：与对照组比较，抵抗素基因转染组抵抗素蛋白平均光密度值显著升高(Plt;0.01);而空质粒组无显著差异(Pgt;0.05)。RTPCR扩增产物电泳表明：抵抗素基因转染组有目的条带出现，而对照组和空质粒组无目的条带出现，细胞葡萄糖摄取实验表明：抵抗素基因转染细胞对葡萄糖摄取作用下降。结论 过度表达人抵抗素基因的胰岛素抵抗的肝细胞建模成功。 【关键词】 抵抗素; 基因转染; HepG2细胞;胰岛素抵抗 2型糖尿病的发病机制主要与胰岛素抵抗有关，抵抗素在啮齿类由脂肪细胞产生并可诱导其产生胰岛素抵抗，而人体内抵抗素主要由单核细胞产生，其诱导人胰岛素抵抗的作用尚无定论。本研究拟通过基因转染技术将编码人抵抗素基因的真核表达载体转染入来源于人的HepG2肝癌细胞形成稳定转染，研究抵抗素诱导人肝细胞性胰岛素抵抗形成的作用，为进一步研究抵抗素诱导胰岛素抵抗的详细分子机制提供科学的研究工具。 　　1