cGMP系列―分析方法验证.ppt

六. 常见典型的验证参数/项目 检测限测定 （1）直观评价法 直观评价法可以用于非仪器分析方法，也可以用于仪器分析方法。一般比色法、TLC等可用此法。 检测限度的测定是通过对一系列已知浓度分析物的样品进行分析，并以准确地测得被分析物的最小量来建立。 （2）信噪比法 该方法仅适用于出现基线噪音的分析方法，如HPLC,GC法多用此法。 信噪比（S/N)一般要求大于3。 六. 常见典型的验证参数/项目 （3）根据响应值的标准差和斜率 检测限=3.3 ×SD/S SD– 响应值的标准差； S—校正曲线的斜率 斜率S可从被分析物的校正曲线来估算; SD值可由下述途径获得： A. 根据空白的标准差 （进几份空白，测定空白背景响应值，计算其标准偏差） B.根据校正曲线 （根据回归线的剩余标准偏差或回归线的Y-轴截距标准偏差都可以作为标准偏差） 此法可用于UV、AA等 六. 常见典型的验证参数/项目 （五）定量限（Limit of quantitation,LOQ） 定义：是指在规定的方法条件下，样品中被测物能被定量检测出的最低量。 说明： （1）其测定结果应具有一定准确度和精密度。 （2）是一种含量测定的定量参数，杂质和降解产物的定量测定时应确定。 （3）通常用定量限浓度除以样品浓度来表示结果 （%或ppm） 六. 常见典型的验证参数/项目 定量限测定 （1）直观评价法 直观评价法可以用于非仪器分析方法，也可以用于仪器分析方法。一般比色法、TLC等可用此法。 定量限度的测定是通过对一系列已知浓度分析物的样品进行分析，在准确度和精密度都符合要求的情况下，被分析物能被定量测得的最小量即为定量限度。 （2）信噪比法 该方法仅适用于出现基线噪音的分析方法，如HPLC,GC法多用此法。 信噪比（S/N)一般要求大于10。 六. 常见典型的验证参数/项目 （3）根据响应值的标准差和斜率 定量限=10 ×SD/S SD– 响应值的标准差； S—校正曲线的斜率 斜率S可从被分析物的校正曲线来估算; SD值可由下述途径获得： A. 根据空白的标准差 （进几份空白，测定空白背景响应值，计算其标准偏差） B.根据校正曲线 （根据回归线的剩余标准偏差或回归线的Y-轴截距标准偏差都可以作为标准偏差） 此法可用于UV、AA等 六. 常见典型的验证参数/项目 （六）线性（Linearity) 定义：是指在给定范围内，测试结果与样品中被检测物浓度（含量）成比例关系的能力。 换句话说，就是试验结果（或测得响应信号）与供试物浓度（或质量）的变化成线性关系。 六. 常见典型的验证参数/项目 线性测定 （1）线性关系饿测定应在规定的范围内进行。 （2）在规定范围内，至少制备5个不同浓度的溶液，每个浓度测定3次，然后用响应信号平均值对被测物浓度做校正曲线。 （3）列出线性回归方程，线性相关系数（r), y-轴截 距，剩余方差等。 （4）r越接近于1.0，表明线性关系越好。 （5）方法目的不同，对R要求不同。（常量分析方 法，R0.999,残留溶剂和清洗方法验证要求0.99以上） 六. 常见典型的验证参数/项目 （七）范围（Range) 定义:分析方法范围是指样品中被分析物的较高浓度（量）和较低浓度（量）之间的一个区间，并已证实在此区间内，该方法具有合适的准确性、精密度和线性。 通常以分析方法测定结果相同的单位表示，如%或ppm。 六. 常见典型的验证参数/项目 范围确定 （1）确定范围的方法是:样品中含有被分析物的量，无论在范围内或在范围末端，该分析方法均能获得良好的线性、精密度和准确性。 （2）原料药或成品含量测定：80%~120%。 （3）制剂含量均匀度检查：范围应为测试浓度70%~130%，其他剂型，参照药典。 （4）对于溶出度试验：应为限度的±20%。 六. 常见典型的验证参数/项目 范围确定 （5）对于杂质检查：拟订出规定限度的50%~120%。 注：通常我部门做杂质分析方法验证，选择范围为LOQ~150%水平，使测定结果涵盖在方法涵盖的范围之内。 （6）如果含量测定与杂质检查同时测定，用百分归一化法，则线性范围应为杂质规定下限的-20%至含量限度（或上限）的+20%。 六. 常见典型的验证参数/项目 （八） 耐用性（Robustness) 定义：是指在测定条件有较小变动时（但仍在正常允许使用范围内），测定结果不受影响的程度，也即证明方法的可靠性。 开始做分析方法研究时，应考虑其耐用性。 如测定条件要求苛刻，则应在方法中注明。 通过