新课标人教版高中生物选修3细胞工程.ppt

* * 二、动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 动物细胞工程常用的技术手段 其中，动物细胞培养技术是其它动物细胞工程技术的基础。 (一)动物细胞培养和核移植技术 1、动物细胞培养概念: 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工控制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 植物组织培养 2、动物细胞培养的过程: （1）选材： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 （2）分散成单个细胞 它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。 成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，它们与细胞一起，形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 （3）在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？ （4）动物细胞生长特性 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生 长到表面相互接触时，细胞就会停 止分裂增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制。 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。 原代培养： 从机体取出组织用胰蛋白酶消化后进行的初次培养。 (5)培养阶段： 传代培养： 将原代细胞从培养瓶中取出，重新用胰蛋白酶处理，配制成细胞悬浮液，然后，分瓶继续培养，让细胞继续增殖，称为传代培养。 传代培养的细胞能一直传代下去吗？ 不都能 传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般来说，细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能发生变化，当继续传代培养时，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性。 所以，目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。 培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质改变 动物细胞培养不能 最终培养成生物体 3、动物细胞培养条件 （2）营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、维生素、促生长因子等。合成培养基） （1）无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 血清、血浆 独特之处： （1）液体培养基（动物体细胞大都生活在液体的环境） （2）成分中有动物血清等 （3）温度和pH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 （4）气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 二氧化碳培养箱 细胞的全能性 大量细胞 植物体 培养结果 获得细胞或细胞产物 快速繁殖植株 培养目的 葡萄糖、血清、血浆 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 4、动物细胞培养技术的应用 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 (二)动物体细胞核移植技术和克隆动物 1、概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物 --克隆动物 （难度高） 受体细胞：MⅡ期的卵母细胞 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 核移植 细胞分化程度低，恢复全能性容易 供体细胞（供核） 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞（MⅡ中期：供质） 去核 无核卵母细胞 注入 细胞 融合 重组细胞 构建重组胚胎 胚胎 移植 代孕母体 生出与供体遗传基础相同的犊牛 2、体细胞核移植过程 克隆牛 归纳: 1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植 2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状 3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状 胚胎细胞核移植 ： 由同一枚