生物化学课件(dna复制,生物合成).ppt

一摩尔十碳的饱和脂肪酸经β-氧化的产物是什么？这些产物最终彻底代谢，可产生多少摩尔的ATP？ 尿素循环发生在细胞内的什么部位？经尿素循环清除的两分子氨基氮的来源是什么？ 乙酰CoA在代谢中起着重要的作用，试用图解的方式画出乙酰CoA可能的来源和去路。 第十二章 DNA的复制、修复及重组 DNA的复制 DNA的损伤与修复 遗传重组 DNA的复制 DNA复制：是指亲代的DNA双螺旋链解开，分别做为模板，指导子代DNA合成的过程 DNA的复制： ?亚基与模板的结合 DNA的复制 DNA复制的过程： DNA复制的过程： DNA复制的过程： 真核生物DNA的复制： 真核生物染色体有核小体结构 真核生物基因组庞大 真核生物DNA上往往有多个复制子 真核生物DNA的复制子在每个细胞周期仅起始复制一次 DNA的损伤与修复 DNA的损伤： 化学诱变：碱基置换；DNA片段的缺失和插入；移码突变；插入失活 物理因素致突变 致癌剂致突变 DNA损伤后修复： DNA损伤后修复： DNA损伤后修复： DNA损伤后修复： Summary DNA复制的特点:半保留复制，半不连续复制，双向复制 复制体的组成， DNA复制的过程 DNA的损伤后修复 滞后链合成过程中DNA聚合酶Ⅲ的移动 滞后链RNA引物的切除： DNA聚合酶Ⅰ的5’ ? 3’核酸外切酶活性 滞后链的连接： DNA连接酶 DNA聚合酶Ⅰ DNA连接酶的作用机制 DNA连接酶 3. 复制的终止：大肠杆菌染色体复制的终止 1. 直接修复：指经酶促反应进行修复的过程。包括光修复和单个酶的直接修复作用。 鸟苷酸的甲基化导致碱基的错配 甲基转移酶对甲基化鸟嘌呤碱基的作用 2. 切除修复：指在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损的部分切除掉，并以完整的那一条链为模板，合成出切除的部分，DNA结构恢复正常的过程。 核苷酸切除修复 碱基切除修复 3. 错配修复：修复在复制过程中错配且没有被校正的单个或少数碱基。 * * DNA RNA 蛋白质 转录 翻译 逆转录 复制 遗传中心法则 1. 半保留复制：通过DNA复制产生的新的DNA双链中，一条链来源于亲代的DNA，另一条则是新合成的。 1958年Meselson 和Stahl 2. DNA复制的起点和方式 复制子：基因组上能独立进行复制的单位称为复制子。每个复制子都含有自己的复制起点。 双向复制：在有些生物体中，DNA的复制是双向复制。 大肠杆菌染色体的双向复制示意图 大肠杆菌染色体复制过程中的?形结构 双向复制及单向复制中的复制叉结构 复制叉：DNA复制过程中，亲代DNA双链由复制起点开始逐渐部分解链，形成一个复制叉结构。 3. DNA聚合酶：参与DNA复制的主要酶,该酶催化四种dNTP合成DNA。 DNA聚合酶 模板链 合成的新链 DNA聚合酶的反应特点: 1. 以四种dNTP为底物 2. 反应需要接受模板的指导 3. 反应需要有引物3’羟基存在 5. DNA链的合成方向为5’→3’ 4. 反应需要有二价金属（主要是Mg2+）的存在 4. 大肠杆菌DNA聚合酶：主要有三种 DNA聚合酶Ⅰ：1956年kornberg首次发现 ⑴ 具有DNA聚合酶活性 ⑵ 3’?5’核酸外切酶活性：由3’ 端开始水解DNA链 ⑶ 5’ ? 3’核酸外切酶活性：由5’端 开始水解DNA链 ⑷ 从3’端发生焦磷酸解作用 DNA聚合酶Ⅰ的3’?5’核酸外切酶活性在DNA复制过程中起着重要的校对作用 DNA聚合酶活性位点 3’?5’核酸外切酶活性位点 DNA聚合酶Ⅰ的5’ ? 3’核酸外切酶活性一般作用于双链DNA的配对碱基，从5’ 端水解核苷酸。DNA聚合酶Ⅰ的5’ ? 3’核酸外切酶活性在DNA复制和修复中起着重要的作用。 DNA聚合酶Ⅰ的结构：单链多肽。用枯草杆菌蛋白酶进行有限水解，可以得到两个大小不同的片段。 Klenow片段：包含有3’?5’核酸外切酶活性和DNA聚合酶活性 DNA聚合酶Ⅱ：多亚基聚合酶，含有DNA聚合酶活性和3’?5’核酸外切酶活性，不具有5’ ? 3’核酸外切酶活性。反应中需要有NH4+的激活。是一种主要起修复作用的酶。 DNA聚合酶Ⅲ：多亚基聚合酶，包含有10个亚基。其中α 、ε、和θ亚基构成所谓核心酶。被认为是大肠杆菌细胞内真正负责DNA复制的聚合酶。 1. 其α亚基具有DNA聚合酶活性，当和其他亚基构成全酶时，聚合效率可达到1000bp/sec. 2. 其ε亚基具有3’?5’核酸外切酶活性，起校对作用。 3. 不具有5’ ? 3’核酸外切酶活性 Sliding clamp subunits Catalytic subunit Catalytic subunit 3’ 5’ exonuclease subunits 大肠杆菌DN