重组肝再生增强因子对5%2f6肾切除大鼠模型肾性贫血影响.pdfVIP

中文摘要 重组肝再生增强因子对5／6肾切除 大鼠模型肾性贫血的影响 摘 要 目的：肾性贫血是慢性肾衰竭病人常见的并发症之一， EPO是治疗 ‘肾性贫血的主要药物，但是外源性EPO有诸多不良反应(如高血压、血 粘度的升高、血管通路血栓形成、透析管道凝血、高钾血症、肌痛、流感 样症状等)，且尚有部分病人对rHuEPO反应低下。 正常情况下成人EP090％由肾脏产生，不到10％来自肝脏。肾脏产生 EPO的部位为肾小管周围的成纤维样细胞。慢性肾衰竭时，肾性贫血与 整，怎样促使肾外EPO的产生是目前研究的疑点与难点【11。 ofliver 肝再生增生强因子(augmenter Hagiya等从新生大鼠肝脏中纯化并克隆出的一种具有热稳定性的非特异 性促进肝细胞再生因子，由125个氨基酸构成的小分子蛋白质，分子量为 。15 Kdat21。ALR具有非种属、非组织、非器官特异性，在肝脏、肾脏中有 高表达。慢性肾衰竭时肾脏不能产生足够的EPO，此时由于肝脏Kupffer 细胞也能合成分泌EPO，所以肝脏可有一定的代偿作用【3，4】。研究发现： 复制，蛋白合成14,5]。但是目前尚无肝再生增强因子(ALR)在慢性肾衰 竭中的研究。本课题利用5／6肾切除大鼠模型探讨ALR在慢性肾衰竭中的 作用，为肾性贫血探索新的治疗方法。如果人工合成肝再生增强因子可以 治疗肾性贫血，将更符合生理要求，可减少rHuEPO的用量及其带来的许 多不良反应，为重组肝再生增强因子在临床上治疗肾性贫血提供实验性理 论依据。有可能使其成为一种理想的治疗方案。 方法制备模型，在严格无菌条件下，切除右肾，一周后切除左肾2／3。手 对照组大鼠同时给予等量生理盐水腹腔注射。隔日注射1次，共2周。观察 中文摘要 大鼠精神状态，活动度、毛发光泽度、摄食及死亡情况，每周观察一次体 重，观察体重变化。各组大鼠于用药结束后24小时，氯胺酮麻醉后心脏采 血，观察各项指标。应用日本SYSMEX型全自动血细胞分析仪测定血色素 AU400型生 5400型生化仪测 化仪测定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)；采用OLYMPUS Masson染色观察肾脏病理学改变，HE染色观察肝脏病理学改变。免疫组 ．织化学法检测肝肾组织中的肝再生增强因子(ALR)、增殖细胞核抗原 (PCNA)。WestemEP迹法检测肝肾组ALR蛋白的表达。 结果： l肾脏大体外观改变，对照组大鼠术后残肾体积增大，被网膜包裹难 以剥离。手术切口瘢痕处内陷，其余部分外凸，形状不规则。rhALR组亦 有上述改变，但较轻。 2外周血象及肾功能变化：假手术组、对照组和rhALR组小鼠血 25．31+2．6 计学意义，表明贫血改善，肾功能损害减轻。 处理后EPO分泌尚未恢复正常。 4肾脏病理学变化肾脏大体外观改变，对照组大鼠术后残肾体积增 大，被网膜包裹难以剥离。手术切13瘢痕处内陷，其余部分外凸，形状不 中文摘要 规则。rhALR组亦有上述改变，但较轻。组织解剖学改变假手术组肾脏 外观光滑，肾小球、肾小管、肾间质结构正常。对照组大鼠肾脏外观明显 增大，呈苍白色，表面凸凹不平，肾盂扩张；光镜下Masson染色显示鼠 肾小球代偿性肥大、系膜增生、局灶节段性肾小球硬化； 肾小管萎缩， 小管细胞可见变性、坏死、脱落；肾间质胶原成分增多，部分肾间质纤维 化，局灶淋巴．单核细胞浸润伴有炎性细胞浸润。rhALR组肾小球、肾小 管、肾间质纤维组织增生病变程度明显减轻。 5肾组织ALR的表达变化：假手术组大鼠肾组织ALR仅在肾小管上 皮细胞有少量表达，表现为肾小管上皮细胞包膜及胞浆均匀分布的