王镜岩生物化学第12章核酸通论.ppt

第12章 核酸通论 ; 1869年Miescher博士论文工作中测定淋巴细胞蛋白质组成时, 发现了不溶于稀酸和盐溶液的沉淀物, 并在所有细胞的核里都找到了此物质, 故命名核质(Nuclein)。; 1909年Levene发现酵母的核酸含有核糖。 1930年Levene发现动物细胞的核酸含有一种特殊的核糖即脱氧核糖, 得出了一个错误概念: 植物核酸含核糖,动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年，这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸-核糖(碱基)-磷酸”的骨架结构, 解决了DNA分子的线性问题, 还在1935年提出“四核苷酸”学说, 认为这四种核苷酸的聚合体是构成核酸的基本单位。; 1944年Avery重做1928年Griffith的细菌转化实验，证明DNA是遗传物质。; 1950年Chargaff,E和Hotchkiss,R.D.采用纸层析法仔细分析了DNA的组成成分, 得知[A]=[T], [G]=[C], [A+G]=[C+T] 1953年Watson, Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果, 提出了DNA的双螺旋模型(Double helix)。几星期后提出了半保留式复制模型。 1957年Meselson Stahl用密度梯度超离心法, 证实半保留复制假说。 1958年Kornberg得到高纯度的DNA polymerase, 这种酶需要一个模板DNA。 1960年Cairns拍摄了复制中的细菌DNA的电镜照片。 1970年发现第一个DNA限制性内切酶。 1972年建立DNA重组技术。 1978年建立DNA的双脱氧测序法。 1990年开始实施人类基因组计划。 2003年人类基因组计划宣告完成测序任务。;二、核酸的生物功能 (一) DNA是主要的遗传物质 ; 1944年Avery重做1928年Griffith的细菌转化实验，证明DNA是遗传物质。但人们对此持怀疑态度，理由是： （1）因认为蛋白相对分子质量大，结构复杂，二十种氨基酸的排列组合将是个天文数字，可作为一种遗传信息。而DNA相对分子质量小，只含4种不同的碱基，人们一度认为不同种的有机体的核酸只有微小的差异。 （2）认为转化实验中DNA并未能提得很纯，还附有其它物质。 （3）即使转化因子确实是DNA，但也可能DNA只是对荚膜形成起着直接的化学效应，而不是充当遗传信息的载体。;1952年Hershey and Chase的实验进一步证明DNA是遗传物质;物种 ;2.原核生物基因组的特点 通常只有一个DNA分子；无重复序列；功能相关的基因常构成一个转录单位；有重叠基因。;3.真核生物基因组的特点 （1）有重复序列，中度重复序列可重复几十次到几千次，如rRNA基因、tRNA基因和某些蛋白质的基因；高度重复序列可重复数百万次，如卫星DNA和微卫星DNA。 （2）有断裂基因，不少基因含有称作内含子的非编码区，编码区称作外显子，有些基因可含有几十个内含子。;人类基因组序列的类型;;(二) RNA功能的多样性 1.某些病毒的遗传物质; 2.控制蛋白质的合成; 3.遗传信息的加工; 4.基因表达和细胞功能的调控; 5.催化功能; 6.在细胞分化和个体发育中发挥重要作用; 7.在生命起源中可能有重要作用。;第13章 核酸的结构 ; 一、核苷酸 核酸可以水解成核苷酸，核苷酸可以水解成磷酸和核苷，核苷可以水解成戊糖和碱基，碱基可以分成多种类型。 (一) 碱基 ;; 与氨基酸一样，碱基在细胞中也受到各种各样的修饰，其产物常常扮演信号传导信使分子、营养因子、辅酶等角色，并对核酸结构的稳定性起着重要作用.;;内酰胺;(二) 核苷 ;;(三) 核苷酸;;二、核酸的共价结构 (一)核酸中核苷酸的连接方式 ;核酸的一级结构： 碱基的排列顺序 DNA 5- ATGCATGC……3 3- TACGTACG……3 RNA 5- AUGCAUGC……3 核酸的二级结构： 形成双螺旋和单链环 核酸的三级结构： 空间构象;(二) DNA的一级结构;三、DNA的高级结构 (一) DNA碱基组成的Chargaff规则，见表13-5 (二) DNA的二级结构 依据：Chargaff规则；X衍射图；碱基不可滴定。; 要点（1）两条链反向平行，绕同一轴相互缠绕成右手螺旋；（2）磷酸和戊糖交替处于螺旋外围，碱基处于内部，形成碱基对；(3) 双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34