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cmyc 反义核酸对乳腺癌MCF7细胞生长及hTERT基因表达影响 　 作者：马莉,税青林,张莉娟,彭春,赵小平 【摘要】 目的 探讨脂质体介导cmyc基因反义寡核苷酸（Antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide，ASODN）对MCF7细胞生长及其人体端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）基因表达的影响。 方法 将cmyc正、反义寡核苷酸（ODN）分别导入各组MCF7细胞中，MTT法、逆转录聚合酶链法及流式细胞术分别检测各组细胞生长情况、hTERT mRNA的表达水平以及细胞凋亡率。结果 cmyc ASODN转染MCF7细胞24h后，细胞生长受到抑制（P＜0.05），并且hTERT mRNA表达明显降低；随着反义核酸作用时间的延长，凋亡细胞数目逐渐增多，细胞生长及hTERT表达的下降随时间延长逐渐明显。对照组、LRSODN组、LRASODN 24h组与LRASODN 48h、72h组相比有明显统计学差异（P＜0.05）。结论 cmyc反义寡核苷酸能显著下调细胞中hTERT基因的表达活性，诱导MCF7细胞凋亡，并抑制MCF7细胞生长；在一定程度上，其效果与时间呈正相关。 【关键词】 乳腺肿瘤；cmyc；人端粒酶逆转录酶；反义核酸；MCF7细胞 　　Abstract：Objective To investigate the effects of cmyc ASODN on MCF7 cells growth and the expression of hTERT gene in MCF7 cells.Methods After transfecting cmyc SODN and ASODN to MCF7 cells,we measured the proliferation,apoptosis rates and the expression of hTERT mRNA respectively by MTT method,flow cytometry analysis and RTPCR.Results When cmyc ASODN affected MCR7 cells at 24h,cells growth was inhibited significantly (P＜0.05) with hTERT gene expression of MCF7 cells descending significantly (P＜0.01).The apoptosis rates of the ASODNtreated cells rised significantly at 48h.The described effects of suppression on cells rised with time increasing.Conclusion cmyc ASODN can effectively inhibit the MCF7 cells growth,induce apoptosis,and downregulate hTERT gene expression in MCF7 cell.The effects correlated with time to a degree. 　　Key words：Breast neoplasms; cmyc; Human telomerase reverse transcriptase; Antisense Oligonucleotide; MCF7 cell 　　0引言 端粒酶是维持染色体结构和功能稳定的一种核糖核蛋白复合体，在几乎所有的人类恶性肿瘤细胞中均高表达[1]。其最重要的成分是人端粒酶催化亚单位，又称人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT），被认为是端粒酶激活的限速因素。随着hTERT基因克隆[2]成功，对其的调控研究成为端粒酶研究的重点。 cmyc是一类参与细胞增殖与分化的原癌基因，通过基因扩增、逆转录酶插入和染色体易位等方式表达失调，在大多数的肿瘤中都有高水平的表达[3，4]，并且cmyc是第一个被发现的调节hTERT基因表达的重要转录因子[5]。许多研究报道，在恶性肿瘤细胞中cmyc与hTERT 的表达密切相关。Oh 等[5]报道，与正常细胞相比，myc蛋白在肿瘤细胞中表达显著增高；激活或抑制myc蛋白表达可以改变hTERT启动子活性，认为myc蛋白对hTERT启动子的调节作用可能与其促进肿瘤形成有关。而目