富血小板血浆对脱位再植牙牙周组织愈合的影响的研究.pdfVIP

合，使用无菌圆柱状硅胶塞于培养孔中央轻压并轻柔旋转，产生直径约8mM的圆 形损伤区，显微镜下检查损伤区无细胞残存…。PBS冲洗两次，加入含lO％d牛 天换液。于损伤制备后第0、l、4、7、9、11天分别取三孔0．75％结晶紫染色后 观察损伤区细胞状况并拍照，而后以30％乙酸对细胞吸收的结晶紫进行提取，1h 后酶联免疫检测仪在492nm波长下检测oD值，比较各观察时间各组OD值有无差 异。 结果 1 PDLFs形态学观察：倒置显微镜下观察，原代细胞约3～7d从组织块周围 游出，放射状生长(图1)。倒置显微镜下观察细胞呈长梭形，胞浆突2～4个，胞 体丰满，胞浆均匀，胞核圆形，核仁清晰，细胞呈漩涡状、栅栏状排列(图2)。 PDLFs传至第三、四代后，部分细胞开始复层生长，明显增厚，出现肉眼可见的 白色结节(图3)，并逐渐增大。 图1原代培养狗PDLFS第5天，可见组织块周围有细胞游出(倒置显馓镜，IOX) 第6页 图2第三代狗PDLFs，细胞生长旺盛，呈漩涡状排列(结晶紫染色，10×) 图3第四代狗PDLFs复层生长，形成肉眼可见的白色结节(倒置显微镜2x) 2 PRP制各：本研究中血样经两次离心后，PRP中血小板数量平均达全血血 小板数量的6．5倍。 3复合生长因子对PDLFs早期附着的影响：细胞消化接种2分钟后，细胞悬 浮，胞体呈球形(图4)；接种2小时后细胞贴壁生长，可见部分突起伸出(图5)。 第7页 各实验组平均0D值见表l，但各组间差异并无显著性。 图4第四代狗PDLFs。消化接种2分钟后(倒置显微镜，10×) 图5第四代驹JPDLFs，消化接种2小时后(倒置显微镜，lOx) 第8页 表l附着实验各组平均OD值 组别 平均OD值 A组0．5950--+00120 B组 0．60500．0460 C组 0．6523±0．0497 D组 O．6527-+0．0741 E组 0．6493-+0．0214 F组0．6313±0．0402 G组0．6463 4-0．0523 H组 0．6373±0．0781 4 PDLFs损伤模型的愈合 损伤l天后，可见损伤区域已有少量细胞，刨缘已不规则：以后损伤区内细 胞逐渐增多，有些区域可见细胞条索与创缘周边细胞相连，有些区域则为散在细 胞覆盖；损伤后第9天开始陆续有细胞到达损伤中心区域，并渐渐将损伤区充满 (图6)。 第9页 b a C d e f 第lO页 h g J k 图6牙周膜成纤维细胞损伤模型损伤后0