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两种洗板方法在ELISA中应用分析 　【摘要】 目的：探讨酶联免疫试验(ELISA)中的洗板技术，试图找到一种简单、高效、经济、实用、可靠的ELISA洗板方法。方法：对753例临床体检乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的标本，分别用手工法和全自动洗板机法两种方法进行洗板，进行组间对比分析；将弱阳性标本选出，重新检测2次，分别用两种方法洗板，看看弱阳性是否因洗板方法不同引起。结果：753例用ELISA方法检测HBsAg试验中，用手工法洗板和用洗板机洗板，经χ2检验，Pgt;0.05，两种洗板方法差异无显著性；18例弱阳性标本检测中，洗板方法的不同，不是造成假阳性的根本原因。结论：两种洗板方法无差别，在ELISA实验中，手工法可以代替洗板机法洗板。手工法简单、高效、实用，应可规范推广。 【关键词】 ELISA洗板；洗板方法；弱阳性 　　Comparison between Two Cleaningmethods on ELISA 　　Abstract: Objective To investigate the cleaningtechnology of the ELISA. Try to find a simple higheffective and utility cleaningtroughs method. Methods To use handle method and autowashingmachine method to clean the troughs of HBsAg with ELISA in 753 healthchecking peoples, Compared between the two cleaningmethods; Meanwhile, to select weak positive samples out and test repeatedly two times, to clean the troughs with the two methods, whether does it exist difference between the two methods.whether does it cause the fake positive by the cleaning methods. Results There is not significant difference(Pgt;0.05)to clean troughs with the two cleaningmethods in testing HBsAg with ELISA in 753 cases,The cleaningmethod isn’t the real cause of the fake positive in testing 18 serum samples of weakpositive. Conclusion Washing with the two cleaningmethods, the result has not difference.the washmachine method can be substituted by the handle method. the handle method is simple, higheffective and practice. 　　Key words: ELISA Cleaningtroughs; Cleaningmethods;Weakpositive 　　在酶联免疫试验中，洗板是非常重要的过程。酶联免疫试验(ELISA)洗涤过程虽不是一个反应过程，但却也决定着实验的成败［1］。ELISA就是通过洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的，通过洗涤以清除残留在微孔板中未能与固相抗原或抗体相结合的物质，以及在反应过程中的非特异性吸附于固相载体上的干扰物质。聚苯乙烯对蛋白质的吸附是普遍的，在ELISA测定的反应过程中应尽量避免非特异性吸附，洗涤时又应将这些非特异性吸附的干扰物质洗涤掉。在ELISA操作中，洗涤是非常关键的，应引起操作者的高度重视。我们对753例用ELISA方法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的洗板过程进行了检测，采用我们自创的人工洗板法和全自动洗板机洗板对比试验，现将结果报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 标本来源及类型 753例标本来源于广东省深圳市龙岗区南岭人民医院2005年12月8日至2006年1月4日的工厂体检血清标本，其中男性121例，女性653例，年龄17岁～43岁,平均年龄为30岁。 　　1.1.2 乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)由上海荣盛生物技术有限