Triturus　全自动酶免仪维护及故障处理.doc

Triturus　全自动酶免仪维护及故障处理 　【关键词】 ,变色龙；操作；维护；故障处理 　　［摘要］ 本文介绍了Triturus全自动酶免仪的操作、维护及故障处理的经验，旨在使用户能了解一些常见的故障发生的原因并及时加以处理，便于提高仪器的使用效率，充分发挥变色龙的快速、准确的性能。 　　［关键词］ 变色龙；操作；维护；故障处理 　　我科于2000年4月引进西班牙Triturus全自动酶免仪(变色龙)。变色龙由电路系统、机械系统、光路系统和液路系统组成，具有自动检测故障的功能，可提示故障原因并报警。使用变色龙5 a来，我们积累了一定的仪器操作、维护及故障处理的经验，现报道如下。 　　1　操作与维护 　　1.1　变色龙只有4个孵育位，一次最多只能放4块酶标板　我们采用“拼板”的形式进行操作：将HBsAg与HBsAb、HBeAg与HBeAb各半块分别拼成一块板，HBcAb半块板。这样，每批可同时处理5个项目。 　　1.2　应急反应程序的编制　当仪器故障或其他原因致使试验不能完成时，可复制原程序，删除已完成的步骤后再进行［1］。 　　1.3　日常维护　开机前查看注射器有无漏水或盐迹，加样针洗槽有无赃物堵塞。开机后，执行PRIME程序，观察加样针及洗板头是否畅通。每批试验完成后，尽快做一次冲洗(RINSE)，关机前，做一次“手工清洗加样针”(MANUAL PROBE WASHING)，用纱布蘸70%酒精擦拭针头和白色绝缘体。每月执行一次液路消毒(DECONTAMINATION)操作以保证液路畅通。 　　2　常见故障及处理 　　2.1　洗板是ELISA的关键步骤　洗板可以分离游离的、与固相抗原或抗体结合的物质，并且可减少样品中与反应无关的蛋白质和其他杂质的非特异性吸附。洗板如不彻底，将使本底增高，结果呈假阳性。变色龙运行正常时，洗板后微孔残留的液体量很少，可以满足ELISA实验的要求。有关洗板的常见故障如下。 　　2.1.1　溶血、脂血及红细胞的干扰　有学者认为溶血、脂血会影响ELISA反应，但现在一般认为溶血、脂血样本对ELISA检测结果影响不大［2］。但笔者发现将血液3 000 rpm/5 min离心后分离的血清直接上机测试，微孔会出现非特异性显色；而将分离的血清5 000 rpm/5 min再次离心使红细胞完全沉淀后上机，可避免上述干扰。其原因可能是：37 ℃孵育后，完整的红细胞较血红蛋白更牢固地粘附于微孔内壁，不易从微孔中洗脱下来。血红蛋白中的铁卟啉是过氧化物酶的类似物，在以HRP作为酶标记物的ELISA测定中，红细胞中的血红蛋白可能会增加非特异性显色［3］。 　　2.1.2　洗板机堵孔　堵孔时，常见整条微孔板均显色。此时，应将洗板头取下，用针挑出或用注射器注水压出堵塞物。堵孔常见的原因如下。 　　2.1.2.1　纤维蛋白　标本中的纤维蛋白没有完全析出，加样后形成纤维蛋白丝，堵塞洗板头。 　　2.1.2.2　洗涤液中的漂浮物　洗涤液放置一段时间后会形成沉淀，进入液路系统后，可使洗板机针孔堵塞。因此，应定期清洗洗涤瓶。 　　2.1.3　微孔板潮湿　微孔板中注满的洗涤液在洗板架移动时，往往会从微孔中流出，可能会对仪器读板的结果及电路有一定的影响。采用WASH程序中的边加边吸的方式，可避免微孔板潮湿。 　　2.2　加样针　是变色龙的精密部件，可以感应血清的量，并且其内层可防血清的粘附。因此，在平时的操作中要加强对加样针的防护。常见的加样针故障及处理如下。 　　　2.2.1　堵塞　将血液于37 ℃水浴，使纤维蛋白完全析出后再分离血清，可防止纤维蛋白堵塞加样针。另外，不宜将含分离胶的试管直接上机：当血清量lt;300 μl时，加样针容易插入分离胶中。特别是使用Triturus 3.0版本，要求的血清量更大，容易发生加样针甚至整个管道系统堵塞。建议将血清移入另一塑料试管再上机测试。 　　2.2.2　撞针　加样针的前端较细，使用或维护不当可能会撞弯甚至撞断。操作者应注意以下几个方面。 　　2.2.2.1　样品盘应保持清洁　当样品盘底部有白色的盐类结晶时，仪器会误判样品盘的初始位，加样针可能会撞到样品盘。处理办法：用纱布蘸70%酒精擦拭底座，用记号笔将样品盘底的白色涂黑。 　　2.2.2.2　试管应垂直放置　另外，盘样品盘孔的四周可以用胶布封住，能有效地防止试管晃动并便于试管的取放。试剂槽一定要准确放到位。否则，加样针极有可能被撞断。 　　2.2.2.3　建议不用一次性吸头加样　金属加样针在套取一次性的吸头的过程中，可能会撞弯针尖。至于携带污染的问题，对于HBsAg等较敏感项目的检测，金属加样针吸样后用10×冲洗程序，其他项目用STRONG档冲洗程序即可有效地避免携带污染的干扰［4］。 　　2.2.2.4　及时清理废弃的一次性吸头　废弃的吸