BMP-2对体外扩增中人胎盘CD133-%27%2b-细胞生物学特性的影响.pdfVIP

壅墨墨堂堕塑主堂垡望皇．墅型壁签堑芏堂主盟△堕垄!墅!!!塑堕笙塑堂鲎丝丝星堕 CD34+CD38-Lin。HSC的增殖反应，在5ng／ml浓度时，对于细胞生长有促进作用； 在50n酌nl浓度时则抑制了细胞的增殖【24】。 本研究采用CDl33作为分选人胎盘HSPCs的表面标志，采用无血清液体扩增 培养体系，观察BMP．2对人胎盘CDl33+HSPcs亚群增殖分化的影响，旨在建立促 进HSPCs增殖，同时又抑制其分化的体外扩增策略，同时试探CDl33+亚群作为一 种研究HSPCs的生物模式对造血负调因子的反应性。 6 篓墨璧堂堕堡主丝i垒窑墅』丝型签丛芏塑±盟△目＆壅!里12兰二塑堡生塑兰鳖丝盟星堕 材料和方法 (一)材料 1、人胎盘的来源 经知情同意后，无菌采集健康足月分娩新生儿胎盘3份，HBSAg(一)，常规 称重。于4小时内进入实验流程。 2、主要试剂见表l Table1．Main reagents 7 试剂名称 生产厂家 备注(续表) APC-IgG2b BDIS，USA 克隆27．35 克隆8G12 Fn℃CD34 BDIS，USA 克隆8G12 Linl一FrrC BDIS，USA Coclccail：CD3、14、16、 19、20、56 Biotee Miltenyihe，USA APc—CDl33，2(293c3) 7．AAD BDIS，USA 荧光标记粘附分子 克隆G．25．2 FⅡ℃-CDlla BDIS，USA 克隆L25 PE．CD49d BDIS，USA 克隆LB．2 FITC．CD54 BDIS，USA 克隆SKll PE．CD62L BDIS，USA 单个核细胞分离纯化试剂 HISTOPAQUE·1077 SIGMA-ALDRICH，Inc·USA密度：1．077 CDl33单选试剂盒 Mm叽yiBiot∞hc，G。。ny 成分：A．FcR阻断剂(人免 疫球蛋白IgG)B．CDl33微磁 珠抗体 NOTE：nleother ale experimentalreagentsanalyticalpure． 3、主要溶液的配制 至7．2．7．4，正压过滤除菌，分装，置40C保存。 O．06，NaCL O．35， (2)D-HaⅡks液(g／L)．-KCLO．40，KI-12P04 8．00，NaHC03 N