缺氧缺血性脑损伤大鼠血清和脾脏TNF-α，IL-6变化及外源性褪黑素对其产生的影响.pdfVIP

缺氧缺血性脑损伤大鼠血清和脾脏TNF-a，IL-6的变化及外源性键黑素对其产生的影响 引言 引 言 brain 新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxie—ischemiedamage，HIBD)是指围产期各 种因素引起的胎儿或新生儿部分或完全缺氧、脑供血减少或暂停而导致的新生儿脑损 伤，临床出现一系列脑病的表现，是围产期足月儿脑损伤的最常见原因，病情重，病 死率耐12】，重度脑损伤常引起新生儿死亡，存活者往往遗留癫痫、脑瘫、共济失调 和智力低下等神经系统后遗症【31。 目前人们已经对HIBD的发病机制进行了不断深入的研究，但尚未完全阐明。主 要学说包括脑能量代谢障碍、兴奋性氨基酸的神经毒损伤、钙内流与缺血再灌注损伤、 自由基损伤及微血管损伤等。近年来，免疫系统在HIBD发病过程中的作用受到重视， 神经系统和免疫系统是维持机体内环境相对稳定的重要调节系统，在中枢神经系统 (CNS)中存在着细胞因子及相应受体，免疫系统可以通过细胞因子对神经系统发挥特 殊的调节作用。国内外学者研究都有发现，HIBD时脑组织内及外周免疫系统的多种 细胞因子的活性可发生变化。在脑神经组织受到缺氧缺血性损伤后，激活的免疫细胞 以及神经胶质细胞等产生的细胞因子能促使自细胞的积聚，引起局部的炎症反应，加 重缺氧再灌注损伤，同时，有些细胞因子又能够调节CNS内神经细胞的生长和功能， 对缺氧缺血性脑损伤有修复作用【4那。因此推测，HIBD可以影响机体的免疫状态， 傲活某些细胞因子，并对神经组织发挥一定的损伤和保护作用，如何调节细胞因子的 活性，使其对缺氧缺血性脑损伤发挥保护作用是值得探讨的问题。 褪黑素(melatomn，MT)是主要由哺乳动物和人类的松果体分泌的一种吲哚类激 素。目前的研究认为，MT具有调节昼夜节律、季节性生殖、抗肿瘤、抗氧化、增强 机体免疫力等生物学作用(61。近年来，MT在免疫系统的作用得到普遍的关注，人们 发现白细胞、单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、NK细胞等特异和非特异眭免疫细胞 上都具有MT受体，提示MT对多种免疫细胞的功能有调节作用【71。进一步研究发现， 切除大鼠、小鼠松果体后机体细胞免疫功能下降，小鼠在注射MT后，NK细胞后性 可明显增强，细胞因子如IL一2、IL一6等表达增加【81。另外，在组织炎症等情况下， MT又能抑制TNF—a等炎症因子的释放从而减轻组织损伤[91。由此可见，在不同的病 理生理状态下，MT对多种细胞因子具有不同的调节方式，但具体机制尚不确切。 缺氧缺血性脑损伤大鼠血清和脾脏TNF—n，IL-6的变化及外源性褪黑素对其产生的影响 引 言 目前有关HIBD的免疫学研究报道甚少，褪黑素对新生动物HIBD时免疫功能的 影响还未见报道。我们课题组已经研究了新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后松果体细胞的 一氧化氮合酶与细胞凋亡的关系，新生大鼠缺氧缺血性脑损伤对松果体合成褪黑素功 能的影响”…，以及褪黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤治疗作用的实验研究，发现褪 黑素对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有保护作用。 本实验用7日龄的新生SD大鼠建立缺氧缺血性脑损伤模型【“】，并给予外源陛的 褪黑素干预治疗。通过研究血清、脾脏组织细胞因子的变化和褪黑素对其产生的影响， 探讨细胞因子在缺氧缺血性脑损伤中的作用和褪黑素对细胞因子的调节。一方面，从 免疫调节的角度分析褪黑素在缺氧缺血性脑损伤中的作用，同时为免疫干预在缺氧缺 血性脑损伤中的应用提供一定的线索。 缺氧缺血性脑损伤大鼠血清和脾脏TNF—a，IL一6的变化及外源性键黑素对其产生的影响第一章材料和方法 第一章材料和方法 1．研究对象 2002—0008，雌雄不限，体重l 1-149，由苏州大学医学院实验动物中心提供。 2．主要实验设备和仪器： (1)常压低氧舱：上海儿科研究所陈惠金等研制 (2)8％氮氧混合气：中外合资上海彭浦气体有限公司 (3)CY．100数字测氧仪：浙江省建德市利达仪器厂 (4)YP．90暖箱：宁波戴维医疗有限公司 (5)Kryomatl700振动切片机：德国Leltz公司 (6)0Ijn咿’us显微镜：日本oI?ⅢPUS公司 (7)PE960