昆虫围食膜蛋白抗体对杆状病毒感染性的影响.pdfVIP

前言 围食膜0erin唧岫cmembrane，PM)是昆虫中肠分泌的一层特有非细胞结构，由 不含糖蛋白、糖蛋白、蛋白多糖和几丁质组成，是昆虫中肠细胞抵御随食物摄入的 病原微生物入侵的第一道天然屏障。 1、围食膜的结构和组分 围食膜的结构和组分因虫种不同而异，通过X-射线衍射分析和凝集素结合实验 表明围食膜由几丁质微纤丝构成。微纤丝通常以10根为1组平行排列或以更多的 排列成束状微纤丝柬。纵横的几丁质纤丝相交成606或90。的网格结构，或者以任意 方向形成密集的网状结构，且在一层膜上也存有不同的网格形式。蛋白质．碳水化合 物充塞在网格空隙中。直翅目昆虫围食膜有几层相似的网格组成，球螋 而檐“肠口““伽胁r耙的网格为矩形且有几个不同的层次，内层的网中没有基质，外层 的则有排列不规则的纤丝和基质组成【”。Brandt等电镜观察黄杉毒蛾0秽ctes n口戚∞Ⅲ豇的围食膜厚约1脚，分为微纤维层、粗糙层和精细层，且网格呈六边形12J。 埃及伊蚊4e如s4e影彬幼虫围食膜约厚堆m，邻近于肠腔上有球状层以及精密的纤 维状物质分开的34层粗糙的纤纠3J。 直至目前，已知围食膜的组分包括几丁质、蛋白质、酸性粘多糖、中性多糖、粘 蛋白、透明质酸、己糖胺、葡萄糖和葡萄糖酸等，其中几丁质占4％～20％；蛋白质占 20％～55％，依据其提取的难易程度将蛋白质分为：共价结合于围食膜的：非共价但紧 密结合于围食膜的；外缘蛋白，用温和的除垢剂可被移除的；在低或高的离子浓度下可 移除的14J。糖弹白可增加围食膜屏障的致密性、坚韧性和半渗透性【5捌，这种致密性对 阻止微孢子虫侵入蜜蜂中肠细胞起决定性作用191。粘蛋白形成围食膜的其余部分，其 多聚糖侧链形成高度伸展、缠绕的结构；同时亲水带电荷的糖基及硫酸根，可吸引渗 透性好的C矛+并吸进大量的水。水溶性粘蛋白的抗挤压能力加上几丁微纤丝的弹 力可保证圉食膜的机械强度，这可能是围食膜通透性的主要决定因素【10l。 大多数蚊虫的围食膜呈现多层及微丝状结构特点。有的4～瓤m厚，如伊蚊、脉 毛蚊及按蚊，而黑尾脉毛蚊(血舰觚me，口删，口)则具扯m厚的围食膜，且无定形fll】。埃 及伊蚊的围食膜为层状，由抛物线形丝状体组成。富含葡糖胺的库蚊围食膜亦多里层 状结构。而按蚊的围食膜以半乳糖胺替代了葡糖胺，形成的围食膜没有定形结构，多 里颗粒状而没有明显的层状结构【12l。也许几丁质为围食膜层状结构的骨架，具支持 作用。几乎所有研究过的围食膜(按蚊除外)均具有含几丁质组分的微纤丝网，微纤丝 随机交错或以正交方式组织排列，然而，后者所形成的空间方式，对相应围食膜的渗透 特性并不重要，这些空间间距可达100～200nm，可允许很大的分子通过，微纤丝网可 能为国食膜更重要的功能所必需IlJ。 关于围食膜的组成，一般来讲，成蚊围食膜由几丁质、蛋白和蛋白多糖组成11“。 因蚊种和形成的阶段性差异，围食膜所含的这些成分的量有所不同。而且，因难以收 集到完整的且不被污染的围食膜，只能测知其相对含量。几丁质成份约占围食膜的 3％～13％，主要由N一乙酰葡糖胺组成，围食膜多由a和丫型几丁质组成n型几丁质 构成交叉链，丫几丁质则以三段链按不同的方向排列。在某特定的情况下，几丁质的类 型或许与其功能有关。如维持围食膜的韧性，特别是使围食膜具有伸缩性。但几丁质 对于围食膜的重要性仍不十分清楚。 围食膜的其余成份为蛋白、糖蛋白和蛋白多糖形成的复合物。在许多昆虫中， 间，多为糖基化蛋白。埃及伊蚊和冈比亚按蚊围食膜约有40种主要蛋白，其中15种 主要蛋白是两者所共有的I14】。对于蚊虫围食膜蛋白的生物特性及分子结构，目前了 完整性是必需的，而且，内部蛋白潜在的交联功能使围食膜具渗透性能。另外，蛋白多 l 糖的疏水性有助于围食膜板状网络的形成，并维持围食膜的强度。kh姐c161(1976) 认为蛋白多糖与围食膜的渗透作用有关。糖基化蛋白在病原体与围食膜的关系中可 能具有重要的作用。 的蛋白质种类大约有40种，在角蝇觑I册nD6函f，r妇肿默自，“口中有25～30种，在冈比 亚按蚊和埃及伊蚊的I型围食膜中有20～40种【l_”。其它昆虫II型围食膜中的蛋白 perjtrophin·44，peritrophin．48占70％以上，且已纯化并测序f18J。其主要组分为与几 丁质结合的富含cys的区域，认为此区域对维持围食膜的结构及决定围食膜孔径的