熊果酸对MBT-2细胞增殖、凋亡的影响及可能机制的研究.pdfVIP

刖 舌 1 研究背景 膀胱肿瘤是泌尿系统最常见的肿瘤，其发病率在不同国家差别明显。在美国， 膀胱肿瘤发病率在泌尿系肿瘤中高居第二位，我国则居首位。发病有明显的性别 差异，男女之比约为2．70一3．20：l。临床上主要表现为40岁以后发病率逐渐增高， 60—70岁达到高峰。近年来，随着免疫学和分子生物学的发展，现代医学对膀 胱肿瘤的认识已从早期的宏观水平发展到目前的细胞水平和分子水平。对其病 因、发病机制、临床诊断以及治疗等方面进行了系统而深入的研究，并取得了一 定程度的进展。大多数膀胱癌(包括浅表型和侵润型1表现出空问上的多中心性和 时间上反复发作的特点，而且常规手术治疗后复发率较高。临床上行保留膀胱的 手术治疗后常规进行膀胱内灌注化疗，其短期疗效尚可，而远期效果欠佳，患者 常难以坚持。多数病例术后2—5年内出现复发，相当一部分复发肿瘤的恶性程度 明显增高。目前常用于肿瘤治疗和预防肿瘤复发的化疗药物普遍表现出明显的 毒、副作用。主要影响患者的肝肾功能、造血系统功能，以及消化系统和神经系 统等的功能，患者的工作和生活质量明显受到影响。同时化疗药物普遍价格昂贵， 药物应用疗程较长，多数病患者经济承受能力有限，难以继续接受『F规治疗。现 实迫切要求医疗界能开发出高效、低毒、价廉、副作用少的肿瘤治疗药物。 acid，UA)又名乌索酸，乌苏酸，属三萜类化合物。它广泛分 熊果酸(ursolic 布于自然界，其相对分子量为456。据不完全统计，在自然界至少能从34科108 种植物中分离得到熊果酸，其主要分布在山检、陆英、山楂、车前草、女贞子、 枇杷叶、白花蛇舌草、熊果的叶和果实、夏枯草和山茱萸等植物中，主要以游离 形式或结合成糖苷两种形式存在。熊果酸具有广泛的生物学效应，包括抗肝炎、 肿瘤、病毒、以及抑菌和降血脂等方面，且毒性低，副作用少。上述生物学效应已 引起国内外的重视。 已有实验证实熊果酸具有较强的护肝作用。Saraswal报道¨1熊果酸对CCl4 引起的大鼠肝毒性有保护作用，应用熊果酸作预处理可明显提高大鼠肝细胞的成 活率。同时在实验中还观察到熊果酸具有抗胆汁郁积的作用，在药物作用下，胆 汁流量及其内容物较对照组有明显的增加。此外，熊筱娟等口]发现熊果酸可使急 性肝损伤大鼠的肝内甘油三脂含量和血清SGPT显著下降，而血清甘油三脂和肝 糖原的含量明显增加，同时肝细胞的变性、坏死得到减轻，表现为对急性肝损伤 有显著的保护和治疗作用。还有一些学者报道1341熊果酸对某些微生物表现出良 好的抑制作用，如对金黄色葡萄球菌、枯草月抱杆菌、牙周叶琳菌、中问型吾氏 菌和福氏类杆菌具有明显的抑制和杀灭作用。另外，陈国宝等15J的研究结果表明 熊果酸药物血清可降低轮状病毒的毒力，使病毒感染力下降，增强MA一104细胞 对轮状病毒感染的抵抗作用，同时对己感染轮状病毒的MA一104细胞有明显的治 疗作用。有证据161表明熊果酸甚至对HIV蛋白酶也具有抑制作用。 近年来众多学者研究还发现熊果酸具有较强的抑癌及抗癌作用，其机制可能 是通过不同途径单独或联合发挥来实现。首先，熊果酸是一种较为明确的抗氧化 剂。YOU等【7】报道熊果酸能明显捕获活性氧自由基，在肝微粒体和P一450单胺氧 化酶系中对脂质过氧化物显示出相当强大的抑制作用。也有试验表明熊果酸对坏 氧台酶的活性有较明显的抑制作用。其次，熊果酸对多种肿瘤细胞株的生长有明 显抑制作用，如人肝癌细胞HepGl2、人肺腺癌细胞A一549、白血病细胞P一388和 L一1210等。人类结肠痛细胞株HCTl5及人肝痛细胞HepGl2分别经一定浓度熊 果酸处理一段时间后进行细胞周期分析，发现细胞主要积聚在GdGl期，同时伴 s期细胞减少f舢。Kim等【9】认为熊果酸抑制DNA复制的作用可能与起始阶段复 0]报道熊果 制叉的形成受阻有关，最终导致细胞周期被阻遏。此外，Harmandfl 酸可引起WAFl的表达增加，WAFl是目前已知与细胞周期变化关系密切的细胞 因子之一，推测熊果酸通过增加WAFl的表达造成细胞周期停滞，进而导致细胞 发生凋亡。Baek等㈣总结实验认为熊果酸能诱导人白血病细胞HL．60发生细胞 凋亡，并表现出明显的、嫩度依赖性。再次，熊果酸具有明确的抗血管生成作用。 下杰军等J控岍究了熊果酸对体外f『『L管形成的抑制作用，在实验中观察到熊果酸对 培养血管内皮细