慢性支气管炎大鼠支气管肺组织EGR-1、PDGF-BB表达及药物干预的影响.pdfVIP

前 言 慢性支气管炎(简称慢支)是临床常见病、多发病，随着人口的高龄 化与大气污染的加重，其发病日趋增多。若病情持续进展，常并发阻塞性 肺气肿，甚至引起肺动脉高压、肺源性心脏病，严重影响人们的劳动能力 和生活质量。 慢性支气管炎是指气管、支气管及其周围组织的慢性非特异性炎症， 病因一般认为是由吸烟、感染、大气污染、过敏，营养和免疫等因素引起 气道慢性炎症，以及炎症的反复损伤和气道修复。作为一种慢性非特异性 炎症，慢支的研究已久，但一直未能得出很有意义的结果，也未能明显改 善临床治疗，对于糖皮质激素的治疗也一直存在争议。而同为慢性炎症的 支气管哮喘来说，研究较为有力，目前普遍认为哮喘的本质是以嗜酸粒细 胞为主的气道非特异性炎症，哮喘的治疗也取得了一些突破。近年来逐渐 开始有对慢支发病机制进行分子水平的研究，希望从细胞因子水平诠释其 与临床表现及治疗的关系，但此领域研究仍较少，缺乏全面系统的研究。 作为一种慢性炎症，从病理生理学角度，可以归纳为促炎因子与抗炎 因子失衡引起。这些促炎与抗炎因子来自多种细胞，彼此错综复杂，形成 网络。过去这方面研究较多，作用相对肯定的因子有白细胞介素．6(IL-6)、 白细胞介素．8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-a)[11。 本实验研究的早期生长反应因子一1(EGR．1)是一个被发现能由多种 刺激迅速诱导，并且调控多种靶基因的转录因子。EGR．1基因是立即早期 基因家族的一员，此家族还包括FOS、JUN，和早期生长反应基因2、3、4 的部分，EGR．1具有三个锌指结构。锌指结构能够抓住DNA，在转录因子 和DNA之间起作用，而且是一种最普遍最基本的结构型。人类的EGR．1基 长因子和受体基因相毗邻，如白细胞介素．3(IL-3)，粒一巨噬细胞集落刺 EGR．1基因分布广泛，生长活跃和增生的细胞均可见相对高水平的EGR．1 表达。在成熟鼠的脑、甲状腺、心脏、肺、肾等部位呈高表达状态，脾、 肝、睾丸低表达【4】o能够诱导EGR-1的刺激类型十分广泛，如多种生长因 各种因素诱导EGR．1表达的机制各不相同，表达的时间和程度也有很大差 别。EGR-1激活之后，主要发挥信息的介导偶联作用，调控多种生长因子， 181等等。 目前国内外对于EGR．1与临床关系的研究主要集中于以下两个方面： (1)靶向转录，用于基因治疗。EGR．1启动子能被辐射诱导激活，可使 EGR．1启动子控制的目的基因在空间和时序上定位表达，用较低的照射剂 量就能使治疗基因的表达水平达到抑制肿瘤生长的要求，而且较其他转录 示，EGR-1在肝癌、食管癌等组织中不表达或低表达【14】，而人纤维肉瘤细 胞、乳腺癌、成胶质细胞瘤和骨肉瘤细胞的生长均不同程度地受EGR．1的 抑制【15】。只要确定在肿瘤中EGR．1基因存在表达缺陷，诱导或促进其表达 即有可能达到抑制癌细胞增殖的目的。 目前EGR．1与呼吸系统的研究相对较少。同前所述，实验发现吸烟、 等是慢支发病机制中比较重要的炎症因子。吸烟已经被广泛的接受为 COPD发展的最危险因素。而发现严重吸烟者中只有15％～21％发展了有显 著临床症状的呼吸道阻塞，表明可能有一些基因具有这类疾病的易感性。 Wen Ning等对来自COPD吸烟组的肺组织进行了基因表达的连续分析 可能与慢支发病机制有较多关联。 PD(珂研究相对较多。它主要由血小板、部分肿瘤细胞、成纤维细胞、 平滑肌细胞等产生，主要功能是促进平滑肌细胞、上皮及内皮细胞的增殖， 趋化中性粒细胞、单核细胞、成纤维细胞和血管平滑肌细胞，加速创伤愈 制也受到重视‘埘。关于PDGF与慢支的关系，有研究发现PDGF促进细胞的 增殖分化，从而参与COP])大鼠小气道重塑过程。吸烟可刺激巨噬细胞、 能有关。 本实验通过烟熏加气管内灌注内毒素的方法构建大鼠慢性支气管炎模 型，造模后进行两周的普米克令舒雾化吸入，用免疫组织化学方法及定量 周的糖皮质激素吸入对慢支病理和炎症因子表达的影响，旨在进一步研究 慢支的炎症发病机制，探讨普米克令舒对慢支的治疗效果。 材料与方法 1 实验材料 医学院动物科提供，自由饮水与摄食，生活环境及饲养条件相同 2主要药品、试剂、试剂配制 2．1药品与试剂 乌拉坦 山东齐鲁兴华制药厂