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几种无机阳离子对全蝎抗凝活性影响 　 作者：许光明，罗跃，彭延古，雷田香 【摘要】; 目的 研究全蝎中无机阳离子对全蝎抗凝活性的影响。方法 以凝血酶时间为指标，分别在全蝎提取液中加入相应不同浓度的无机阳离子，考察其对全蝎抗凝活性的影响。结果 加入无机阳离子后，明显缩短了全蝎的凝血酶时间（Ｐ＜０．０１）。结论 铵离子等无机阳离子对全蝎提取液抗凝活性有明显的影响。 【关键词】; 全蝎；抗凝活性；凝血酶时间；无机阳离子 ; 〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｉｏｎｓ ｉｎ ｓｃｏｒｐｉｎ ｏｎ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｎｇ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｃｏｒｐｉｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔａｋｉｎｇ ｔｈｅ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｔｉｍｅ ａｓ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔｓ，ｔｈｅ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｍｉｘｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｃｏｒｐｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｎｇ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｃｏｒｐｉｎ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ． Ｒｅｓｕｌｔ Ｔｈｅ ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｔｉｍｅ ｗａｓ ｄｉｓｔｉｎｃｔｌｙ ｓｈｏｒｔｅｎｅｄ（Ｐ＜０．０１） ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｉｏｎｓ ｊｏｉｎｉｎｇ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Tｈｅ ｉｏｎｓ ａｒｅ ｖｅｒｙ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｔｏ ｔｈｅ ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｎｇ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｃｏｒｐｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ． ; 〔Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ〕 ｓｃｏｒｐｉｎ; ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｎｇ ａｃｔｉｖｅ; ｔｈｒｏｍｂｉｎ ｔｉｍｅ; ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｉｏｎｓ ; 全蝎作为传统的中药材，具有熄风止痉、解毒散结、通络止痛等功效。全蝎除了含蝎毒素、三甲胺、牛磺酸、甜菜碱、胆甾醇、卵磷脂、甘油酯、棕榈酸、硬脂酸、铵盐１７种氨基酸等，还含有Ｃａ、Ｍｇ、 Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｎ、Ｐｂ等元素［１，２］１４１５。实验证明全蝎提取液具有明显的抗凝、抗血栓及促纤溶作用［３，１０］。为进一步研究全蝎抗凝活性的影响因素，本文探索了８种无机阳离子（ＮＨ４＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｐｂ２＋）对全蝎抗凝活性的影响，为临床应用提供依据。 ; １ 实验材料 ; １．１; 仪器 ; Ｓｔａｒｔ－４半自动四通道血凝仪（法国ｓ１１ＡＧＯ公司）；４３００－Ｐｒｏ紫外分光光度计（瑞士安玛西亚公司）；ＨＲ２８３８型匀浆机（菲利普公司）；移液枪。 ; １．２; 试药 ; 全蝎（购自老百姓大药房），凝血酶（上海太阳生物技术有限公司），血浆（自制），生理盐水；ＮＨ４Ｃｌ，ＮａＣｌ，ＣｕＣｌ２，ＣａＣｌ２，ＭｇＣｌ２，ＦｅＣｌ２，ＭｎＣｌ２，ＰｂＣｌ２，ＺｎＣｌ２，无水乙醇，均为分析纯。 ; ２ 方法与结果 ; ２．１; 供试品溶液的制备［３，１０］ ; 筛去尘渣，称取全蝎５０ ｇ，用８倍量的蒸馏水浸泡过夜，用匀浆机以１０ ０００ ｒ／ｍｉｎ匀浆，然后煎煮３次（均为８倍量蒸馏水），每次３０ ｍｉｎ，过滤，合并滤液，水浴浓缩至含生药１ ｇ／ｍＬ，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心２０ ｍｉｎ，分别加无水乙醇至６０％的浓度，４ ℃放置过夜，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心２０ ｍｉｎ，取上清液，水浴浓缩至含生药１ ｇ／ｍＬ溶液，３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心２０ ｍｉｎ，取上清液于４ ℃低温冰箱中保存备用。 ; ２．２; 凝血酶时间的测定方法［４，５］ ; 先取凝血酶用生理盐水稀释至一定的倍数，然后取待测血浆（参比血浆）０．１ ｍＬ，３７ ℃保持２ ｍｉｎ，加入３７ ℃预温凝血酶０．１ ｍＬ摇匀，立即开始测定，记录凝固时间，调节凝血酶时间，使空白时间在２０～２２ ｓ。 ; ２．３; ＮＨ４＋Cl对全蝎抗凝活性的影响 ; 分别取ＮＨ４Ｃｌ供试液，加至ＮＨ４＋的浓度为０、０．０１４、０．０２８、０．０４２、０．０５６、０．０７０、０．１４０、０．４２０、０．７００、０．９００、１．１２５、１．５４０ μｍｏｌ／ｍＬ中。加入血浆，全蝎提取液０．１ ｍＬ，凝血酶０．１ ｍＬ，测凝血时间。每个浓度重复测５次。结果如表１。通过对照在全蝎提取液中加入ＮＨ４Ｃｌ前后的凝血时间表明，明显缩短了全蝎提取液的抗凝时间（Ｐ＜０．０１）。 　 ; ２．４; ＮＨ４＋影响全蝎抗凝活性的确认 ; 由于用ＮＨ４Ｃｌ提供ＮＨ４＋，为了确定其中的Ｃｌ－对全蝎提取液的抗凝活性的是否产生影响，用０．０１、０．１４、１．５４ μｍｏ