羟丁酸钠对大电导钙激活钾通道的作用.pdfVIP

维普资讯 _ 546 ChinJAnesthesiol，September1111． !! -! · 实验研究 · 多 羟丁酸钠对大 电导钙激活钾通道的作用 r广 摘要 目的；应用膜片钳技术研究羟丁酸钠对新生鼠海马锥体神经元大电导钙激活钾通道的怍用。 方法：实验选用培养 3～7天的锥体神经细胞，在对称性高钾溶液中(140raM)，应用细胞贴附式和内面向 外式膜片记录单通道电流。结果：(1)该通道电导为 19OPS左右，随着细胞内钙离子浓度的增加，通道开 放概率明显增加，当膜 内侧加入钾通道阻断剂TEA后通道活动被阻断 ；(2)在细胞贴附式膜片下 ·随着 羟丁酸钠浓度的增加，通道开放概率和平均开放时间逐渐增加(Po．05)。结论：说明羟丁酸钠对该通 道具有明显的激活作用 这种激活作用可能与羟丁酸钠发挥垒麻作用的分子机制有关 扎 全麻机理虽经广泛研究，至今仍不十分清 cI24．55，CdCI20．2、TTX0．001、DIDS0．i，电极 楚 目前认为其作用的分子机制可能与神经元上 液内加入 CdC1、TTX、DIDS的 目的在于分别阻 离子通道活性改变有关 “。。‘。近年来，有文献报道 断钙 电流、钠 电流和氯 电流f细胞贴 附式浴液 全麻药可影响大 电导钙激 活钾通道的活性。“。 (ram)：KC1140、HEPEs15、Cat120．3；内面 向外 而羟丁酸钠虽在临床上应用多年 ，其作用机理至 式浴谖 (ram )：KCII40、HEPES10、EGTA1、Ca— 今 尚不清楚 ，尽管有作者报道它可能与 GABA CI0．82；用 KoH 调节 pH值 至 7．2～7．3。用 受体介导的氯离子 内流有关，但缺乏直接证据， 6．0．2版 pClamp电信号采集程序进行 电流采 为探讨它是否会影响大 电导钙激活钾通道的活 集 。 性 ，本文采用膜片钳单通道记录技术0研究了羟 3．数据分析 用pClamp分析程序 自动测 丁酸钠对新生鼠海马锥体神经元大电导钙激活 量通道的开放概率、电流幅值、开放时间和关闭 钾通道的作用 时间。统计分析用配对 t检验，全部数据甩均数 土标准差 (土 )表示，以PO．05为有显著性 材料和方法 差异 。 1．海马神经元 的培养 选用新生 l～3天 结 果 的SD大 鼠，按照席新正 “等人的方法进行培 养 。 一 、 海马锥体神经细胞大电导钙激活钾通道 2．单通道 电流的记录 用细胞贴附式和 内 的特性 面向外式膜片记录单通道电流 记录仅选用锥体 I．单通道电流及电导应用细胞贴附式膜片 神经元。所有实验均采用对称性高钾溶液。电极 (cell—attachedpatch)，当膜电位为正时 ，可见外 液 (mM )：KCIl40、HEPES10、EGTA5、Ca一 向电流 当膜电位为负对 ，可见内向电流。随着 膜去极化程度 的逐渐增大，单通道 电流幅值增 作者单位 ；610041 成都市 ．华西医科大学附属一 院 王【 大，开放概率 (Po)增加。当膜 电位为OmV 时，无 儒蓉 (研究生)、王泉云]，泸州医学院附属医院(李明星)，车学 通道开放 (见图1)。根据膜 电位与膜电流的关系 院生理教研室 (曾晓荣) 曲线(I—V)的斜率计算其单位电导值为 190．o土