第六章 微生物的生长繁殖与遗传变异.pdf

第六章微生物生长繁殖与遗传变异 Douglas整理 第一节 微生物纯培养 第二节 微生物培养群体生长规律 第三节 微生物的生长环境 第四节 菌种保藏与复壮 第五节 微生物遗传 第六节 微生物变异 ☆ 第一节 微生物纯培养 一、微生物纯培养的概念 纯培养：实验室条件下，由一个细胞或一种微生物繁殖得到的后代。 二、微生物纯培养技术 纯培养基本步骤： (1)分离 (2)培养 唯一、 隔离 稀释平皿法 分离方法 划线法 单细胞挑取法 1、稀释平皿分离法：倾注平皿法和涂布平皿法。 基本过程：（1）梯度稀释过程； （2）分离培养过程 （倾注）融化的琼脂培养基→将细菌悬浮液和琼脂培养基混匀导入培养皿中→菌液和培养基混匀倒入培养基的方法步骤 稀释的细菌悬浮液 （涂布）凝固的琼脂培养基→涂布在琼脂培养基表面→ 涂布步骤 • 同一稀释度三个以上重复,取平均值；每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数。 一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研 中一般用菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而不是直接表示为细胞数。 • 采用平板分离法，要求操作技术熟练、准确，否则难以得到正确的结果 • 样品充分混匀； • 每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液； 稀释平皿分离法使用过程中的几个问题 1) 梯度稀释度的确定： 需分离微生物菌落在平皿中的数量（30-300个/皿） 2) 选择菌落接种的依据： a、菌落特征； b、细菌个体的特征 3) 微生物纯培养的标准： 菌落和个体特征一致性（划线法）；无杂菌菌落 4) 操作要点： 严格无菌操作 第 1 页 共 15 页 第六章微生物生长繁殖与遗传变异 Douglas整理 2、单细胞挑取法： 从待分离材料中挑取单个细胞来培养，从而获得纯培养的过程。 3、划线分离法 用接种环粘取少许待分离的材料，在培养基表面进行多次平行划线，使微生物细胞分开生长以获得微生物纯培养的过程。 三、纯培养的保存处理 保存方式：尽可能降低代谢活性，如低温、干燥、隔绝空气 等 注意点： 1、灭菌彻底 2、无菌操作 3、防止污染 ☆ 第二节 微生物纯培养群体生长规律 生长：生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。 繁殖：生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。 微生物群体生长 一个微生物细胞 合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢 个体生长→个体繁殖 →群体生长 当同化作用的速度超过了异化作用 个体的生长如重量、体积、大小不断增加 群体生长 = 个体生长+ 个体繁殖 当个体生长达到一定程度后就会发生繁殖，引起个体数目的增加 群体内各个个体进一步生长 群体生长 ☆微生物生长的指标（生物量的测定） 细胞群体数量的增加（单细胞） 细胞群体生物量增加（丝状物） 群体生物指标的变化