的分析化学课件第十章.ppt

第十章 吸光光度法(Absorption photometry) 第二节 光吸收的基本定律 对于同一物质，当其它条件一定时， ?的大小就取 决于如射光的波长λ。即?=f(λ) 对于同一物质，当其它条件一定时， ?的大小就取 决于如射光的波长λ。即?=f(λ) 二、引起偏离朗伯－比耳定律的因素 第三节 吸光光度法及仪器 2.特点：简单、可测微量，复合光，误差大。 分光光度计的组成 第四节 吸光光度法分析条件的选择 在分析化学中应用较多的是有机显色剂。 光源 单色器 吸收池 检测系统 显示系统 紫外-可见分光光度计组件 光源 单色器 吸收池 检测器 信号显示系统 氢灯，氘灯，185 ~ 375 nm； 钨灯，400 ~ 2500 nm. 基本要求：光源强，能量分布均匀，稳定 作用：将复合光色散成单色光 棱镜 光栅 玻璃， 360 ~ 3200 nm, 石英，200 ~ 4000 nm 平面透射光栅， 反射光栅 玻璃，光学玻璃，石英。玻璃比色皿——可见光区 石英比色皿——可见光区、紫外光区 作用：接收透射光，将光信号转换为电信号，并放大 光电管，光电倍增管，光电二极管，光导摄像管（多道分析器） 表头、记录仪、屏幕、数字显示 一、显色反应及其条件的选择 （一）显色反应和显色剂 [定义]：将被测组分转变为“有色物质”的反应 M无色 + R = MR有色(主要是络合、氧化还原反应） 1. 对显色反应或显色剂的要求： ⅰ 选择性好（最好是特效反应） ⅱ 灵敏度高（ ?max ﹥104L?mol-1?cm-1） ⅲ 对比度要大，(??max)最大吸收波长相差60nm以上 ⅳ MR稳定，组成恒定 ⅴ 显色反应的条件要易于控制 广义，有吸收 2. 显色剂R（自学P289－P290） 无机显色剂: 过氧化氢，硫氰酸盐，氨水和钼酸铵等。 无机显色剂在光度分析中应用不多，这主要是因为生成的络合物稳定性差，灵敏度和选择性都不高。 有机显色剂与金属离子能形成稳定的、具有特征颜色的螯合物，其灵敏度和选择性都较高。 有机显色剂： （二） 显色反应条件的选择 1 1 1 1 2 3 4 5 6 6 1.溶液的酸度：[H+]一切反应的基础 a.影响M的存在状态， [H+] ↘，M会水解； b.影响[R]及颜色，[H+] ↗，影响[R]（大多有机弱酸） 影响颜色（大多酸碱指示剂） c.影响MRn组成 2.显色剂的用量（CR） 为使显色反应完全，一般R过量（同离子效应），但R也不能大过头，否则，物极必反。 a. R本身有色，空白↗ b. 改变络合比，例：Mo(Ⅴ)与SCN-: CR由实验确定 3. 时间t A t t 由实验确定。显色后，至少应保持到测定工作做完。 4.温度T 大多显色反应在室温下进行，但也有需要加热才能完成的。 V=f(T) T↗, V↗。但T 太↗，有色物分解。 合适的T 由实验确定。 5.溶剂和表面活性剂 溶剂影响有色络合物的离解度 溶剂影响有色络合物的显色速度 溶剂影响有色络合物的颜色 表面活性剂 胶束增溶 形成三元络合物 6. 干扰及消除 a.干扰 干扰物本身有色或与显色剂显色，+干扰 干扰物与M、N反应，使显色不完全，-干扰 b. 消除 控制酸度，使M显色，干扰不显色 氧化还原，改变干扰离子价态 掩蔽 校正系数 参比液：可消除显色剂和某些离子的干扰 选择?测，可避开干扰的吸收 增加显色剂用量，将干扰灌饱 分离 二、仪器测量误差 光度分析法的误差除了来源于朗伯－比耳定律的偏离以外，仪器测量不准确也是导致误差的原因。 任何光度计都有一定的测量误差。这些误差可能来源于光源不稳定、实验条件的偶然变动、读数不准确等。 P286页图10－5： 偏离A=?bC 对同一台仪器，读数的波动对T是确定值，dT=0.002-0.01； 但对A却不确定 我们关心的是浓度测量的相对误差，它就等于吸光度测量的相对误差，从图10-5可以看出，在刻度标尺上，dA在不同位置，不是定值，故改成dT来算。 (6)代入(3): 将T?Er的关系描绘于书293页图10－8 实际工作中，应控制T 在15～70％, A在0.15～0.80之间 (调c, b, ?) 可见：1）当dT一定，T较大和较小时，dC/C均较大；2）T在15%-70%（即A为0.15-0.8）时，由dT引起的Er较小；3）当T=e-1=0