利用间接荧光抗体技术对微小隐孢子虫Cp16蛋白进行抗原定位.pdfVIP

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2017-10-01 发布于北京
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利用间接荧光抗体技术对微小隐孢子虫Cp16蛋白进行抗原定位.pdf

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利用间接荧光抗体技术对微小隐孢子虫Cp16蛋白进行抗原定位.pdf

第38卷第12期东北林业大学学报 V01．38No．12 OFNORTHEASTFORESTRYUNIVERSITY Dec．20lO 2010年12月 JOURNAL 利用间接荧光抗体技术对微小隐孢子虫Cpl6蛋白进行抗原定位1’ 肖丹殷驰李建华宫鹏涛张西臣 (吉林大学，长存，130062) 摘要cpl6基因是从核糖体展示文库中筛选的微小隐袍子黏附相关基因，为了确定Cpl6蛋白是否是微小隐孢子虫卵囊或子孢子表面抗原，构建了Pet一28a—Cpl6原核表达栽体，将其转化至B121大肠杆菌中进行诱导表达，经纯化获得重组蛋白Cpl6。将纯化的重组蛋白免疫BAILB／c小鼠，EUSA方法测定lgG抗体滴度。利用间接荧光抗体技术进行抗原定位的初步研究。结果表明：隐孢子虫卵囊表面及子孢子表面富含Cpl6蛋白。关键词隐孢子虫；cpl6基因；原核表达；抗原定位分类号R382．3 Localizationof Proteinof IndirectFIuorescent Cpl6 Cryptosporidiumparvumby AntibodyTechnique／XiaoDan， Yin ofZootechniesand Chi，LiJianhua，GongPengtao．ZhangXiehen(College VeterinaryMedicine，JilinUniversity， ofNortheast Changchun130062，P．R．China)／／JournalForestryUniversity．一2010．38(12)．一102—103，129 6 wasscreenedfromaribosoaie anadhesionof Cplgene，which displaylibrary，is geneCryptosporidiumparvum．A vectorwasconstructedtodeterminewhether was or surface ex- Pet．28a．Cpl6 Cpl6proteinoocystsporozoiteantigens．The levelsweredeterminedSDS．PAGEandWestern recombinant Was ex． pressive by Blotting．The proteinCpl6purified．The BALB／cmicewereimmunizedwiththerecombinanttOdetectthe titersEUSA．Thelocaliza- perimental protein IgCantibodyby tionofthe ofthe wasdeterminedfluorescent protein(theexpressiveproduct targetgene)inC／x／,rt,u／n by antibodytechnique． Resultsshowedthat WasIceallzedonthesurfaceof and ofc．Don月肌． Cpl6protein oocystsspomzoites 6 localization KeywordsCryptospoHdiumparvum；Cplgene；Prokaryot