还原变性核糖核酸酶在疏水性液!固界面上的复性 - 色谱.pdfVIP

还原变性核糖核酸酶在疏水性液!固界面上的复性 - 色谱.pdf

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还原变性核糖核酸酶在疏水性液!固界面上的复性 - 色谱

! # 年$ 月 !#$ !$ %$ $ ’(’)* ! # !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 %$ ’ %$( 研究论文 +,- :# $ )%!*. /0 $ 1 $ ##!) $ ! # $ %$ 还原变性核糖核酸酶在疏水性液! 固界面上的复性 ! 毕+ 晶,+ 白+ 泉 ,+ 王+ 军,+ 王骊丽 (西北大学合成与天然功能分子化学教育部重点实验室,西北大学现代分离科学研究所, 现代分离科学陕西省重点实验室,陕西 西安 % #( ) 摘要:采用疏水相互作用色谱(?-@ )对还原变性核糖核酸酶 (A%5); )在疏水性液3 固界面上的复性进行了研 究。详细讨论了流动相中脲的浓度、还原型谷胱甘肽. 氧化型谷胱甘肽(B/?. B//B )的比例、流动相 C? 和变性蛋 白质浓度对还原变性 A%5); 复性效率和质量回收率的影响。结果表明,在最优化的复性条件(流动相中含有 !. 4#. D 脲,B/?. B//B 的浓度比为$ / # ,流动相C? 为$. )下,还原变性 A%5); 能完全复性。当变性蛋白质 质量浓度为-. 4(. 4D 时,还原脲变性A%5); 的活性回收率和质量回收率分别为($. E 和 #. (E ,还原胍变性 A%5); 分别为 #. #E 和. $E 。研究表明?-@ 是还原变性蛋白质复性的有力工具之一,可为蛋白质复性研究 提供新方法和新思路。 关键词:蛋白质复性;疏水作用色谱;还原变性;核糖核酸酶 中图分类号:,-$+ + + 文献标识码:+ + + 文章编号:#3$% #) (! # )$3%$3* #$%’()* %$ +#’,-#’. ’#)/0,+#’ 1/2# 3 %) 04# 45’+%64%7(- (8,(’!2%(’ ()0#+$/-# F- 169( ,F- G’59 ! ,H%B 1’9 ,H%B D6#6 (! # $ %’(%)’(# ’* +#, )-)./ %,0 1 %)2(%3 4 2,/).’,%3 5 ’3/23 6-7.8 )(# ’* 5 .,.8 )(# ’* 9 02/%).’, , :,8 ).)2 ) ’* 5 ’0(, +; %(%).’, +/.,/8 ,! # $ %’(%)’(# ’* +; %(%).’, +/.,/ ., +-%%,. = (’.,/ ,1 ’( )-?8 ) @,.(8.)# ,A . ’%, !##$% ,6-.,% ) 3720+/-0 :IJ; K;95*’K5*69 L *J; K;’=;. ;95*’K; A%5); 9 *J; JMKCJ76= #68’63 )#6 69*;KL5=; :5) 69N;)*6(5*; ’)69( JMKCJ76= 69*;K5=*69 =JK45*(K5CJM (?-@ )$ IJ; ;LL;=*) L ’K;5 =9=;9*K5*69) ,*J; K5*6) L K;’=; 59 O66P; (#’*5*J69;) (B/? 59 B//B ),*J; C?

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