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硕士学位论文 刖舌
刖 罱
创面愈合是一个复杂的生物学过程,涉及了组织胚胎学、病理学和生物学
(特别是分子生物学)等多个学科,有多种组织修复细胞、胞外基质成分以及各
类调控因素的参与…。参与创面愈合的调控因素很多。关于以表皮生长因子(EGF)
为代表的各类生长因子对创面愈合的影响,基础研究已进行得相当深入;其临床
应用也已相当广泛。已知表皮生长因子EGFI。’花够特异性地引起细胞外钙离子内流;
而后者可以激活一系列钙结合蛋白,最终引起细胞增殖从而促进创面愈合。’。关
验研究钙离子对细胞迁移的影响。他发现培养基中一旦去除了钙离子后,培养细
胞的活动性就明显降低,这一现象发生得迅速而且可逆,并且很显著。1989年德
离子复合物作对比研究它们对烧伤和放射性损伤创面愈合的影响。结论是
创伤修复启动的过程中出现波动,在创伤修复过程中恢复J下常,且这种浓度的波
动为细胞迁移所必需。迸一步研究“’还发现:浓度为2mM的钙离子与同样浓度的
镁离子联合作用增强成纤维细胞向纤维连接蛋白的迁移。浓度为1—3mM的镁离子
都提示钙离子在创面愈合过程中扮演着非同寻常的角色;也为进一步探讨钙离子
在创面愈合过程中的作用奠定了一定的基础。但国内未见有关钙离子对创面愈合
过程中的作用的文献报道。
已知临床上广泛应用的表皮生长因子EGF能特异性地引起细胞内钙流一过
性的大大增强”1,从而激活一系列的钙反应蛋白,特别是钙调蛋白(CAM)。后者与
核蛋白发生一系列反应,最终引起细胞增殖等一系列细胞行为。这是E6F促进刨
面愈合的分子机制。但细胞外钙离子对创面愈合是否产生影响呢?本研究通过建
立大鼠深JI度烫伤模型,采用同体自身对照,在两侧创面分别外敷一定浓度的氯
颈士学位论文 前言
化钙水凝胶(实验组)和空白基质水凝胶(对照组);通过对两种干预因素观察创面
来初步探讨一定浓度的细胞外钙离予对深TT度烧(烫)伤刨面愈合的影响,探索
深II度烧(烫)伤外用含钙离子水凝胶的可行性。
硕十学位论文 材料与方法
材料与方法
1.1实验动物
学部提供。
1.2主要实验试剂
1.氯化钙粉术(中南大学药理教研室提供)
2.卡波普发泡剂(湖南医药工业研究所提供)
3.TGF-B。单克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)
4.VEGF多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)
5.FGF-B,单克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司)
6.抗体稀释液(武汉博士德生物工程有限公司)
7.DAB显色剂(武汉博士德生物工程有限公司)
合物),复合消化液,抗原修复液。
8.即用型SABC试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)
9.70%乙胺醇和蒸馏水(湖南医药工业研究所提供)
lO.精确PH试纸(湖南医药工业研究所提供)
11.NaOH滴定液(湖南医药工业研究所提供)
12.苏木素 (上海试剂三厂)
13.伊红 (上海试剂三厂)
1.3主要实验设备
1.实验动物手术室(中南大学实验动物学部)
2.手术器械(湘雅医院烧伤科研究室)
包括手术刀、手术剪、眼科剪、手术洞巾、手术镊。
3.实验动物饲养场所(中南大学实验动物学部)
4.免疫组化检测工作台(Biogenexj6000型,美国)
硕十学位论文 材料与方法
5.Ol BX41型,日本)
ympus普通光学显微镜(01ympus
6.Motic显微摄像系统(Moticam2000型,德国)
7.MIAS医学图象分析管理系统(北京航空航天大学)
8.F717数码照相机(日本Sony公司)
9.扭力天平(
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