运动对家兔跟腱断裂术后尿液蛋白质谱的影响.pdfVIP

．^上．-J- 刖 罱 跟腱断裂发病率为6／10万--37／10万…，是一种严重的损伤，在常见的肌腱断裂 中居第三位。Cretnik等【2】报道跟腱断裂平均年龄为37岁，男女之比为8：1，随着国内 外学者对跟腱断裂认识不断加深，已成为众多学者关注的焦剧孓51。随着全国奥运热 潮以及全民健身运动的开展，跟腱断裂的发病率呈现为上升的趋势【5】，75％的跟腱 断裂与体育运动有关。部位常在止点上2--一6cm区域内【5刁】。虽然对断裂的病因尚不 清楚，但随着认识的不断加深以及运动医学发展要求，跟腱断裂的治疗已成为关注 的焦点。由于跟腱断裂一周内治疗临床效果远比一周以上的好，故Garden等【8】认为 一周可以作为急性和陈旧性跟腱断裂的界限。尽管对最佳治疗分歧很大，主张手术 者1992年以来认为运动员、年轻人、陈旧性跟腱断裂应当手术治疗，术后行石膏固 定6～10周不等。但术后制动弊端多，而早期功能锻炼优势明确，两者在一系列观 察指标之间存在显著性差异，早期功能锻炼后跟腱再复发断裂、三头肌乏力等一系 列并发症明显减少，好的断端缝合以及腱周缝合方法可以明显提高跟腱的生物力学 特性【9]。 尿液作为最容易得到的体液，已经被广泛用于研究；作为血液的过滤物，尿液 o】利用LC．MS／MS 中的蛋白和血液中有着相同之处。2001年，ChrisS．Spahr等人【l mass (Liquidchromatography-tandem 白质。尿液蛋白质组资料将有助于分析疾病状态下释放尿液中的蛋白质成分， 白，共鉴定出四十七种蛋白成分【11】。目前尿液的蛋白质谱分析仅限于泌尿系统疾病 以及肾病方面，在其他领域的研究较少，本实验拟探索在跟腱断裂不同模型在不同 愈合期尿液中是否有差异蛋白在不同处理方法下有着差异表达，筛选出尿液中的生 物标志物，为进一步临床研究打下基础。 3 新疆医科大掌医学硕士掌位论文 对象和方法 1研究对象 1．1 目标动物 选用我校提供雄性新西兰白兔，体重为2．8±0．2kg。 1．2主要试剂和仪器 乙腈(CAN) 3．(3。f胆酰胺基丙基)--甲氨基) 丙磺酸盐(CHAPSl 乙腈50％和三氟乙酸O．5％的饱和溶液(SPA) Tris—HCL 二硫苏糖醇(DTT)购自Sigma公司 ProteinBiologySystem(PBSⅡ一c1质谱仪 Chip NP20蛋白质芯片为CiphergenBiosystems公司产品 低温离心机 75％医用酒精 O．5％碘伏 ． Olympus缝合显微镜 chaoshun牌专业电动剃毛器 毋MxSeries360服务器：(IBMInc．美国) 服务器地址：www．zlzx．net · 1．3样本量以及分组方法 分组方法为挂牌标记，先按雄兔各1～108编号，完全随机化分组。模型制作在新 疆医科大学实验动物中心科技楼医学研究中心——实验动物中心完成，均实行12小时 昼夜规律调整，两天后进入实验。预实验共进行模型制作36例，其中10例进入40天 组进行检测。 表1两种模型与正常组取标本时间 (各组在4个时间段中每个时间段模型数平均一样多，都是12只) 4 1．4纳入标准 不同愈合期时间误差控制在一小时以内。手术切口I／甲愈合，跟腱断端组织I期 愈合。 1．5排除标准 跟腱断端发生豁口1．Omm、跟腱断端感染、石膏松动脱落。 2研究方法 2．1模型制作 固定于家兔手术台上，常规备皮(不使用任何化学试剂，使用专业动物褪毛器)， 使用0．5％碘伏消毒，消毒范围从足趾至臀部，再次以75％酒精消毒切口周围以及足