温热化疗对大肠癌细胞的作用及其对肿瘤细胞内HSP70表达的影响.pdfVIP

2005级硕士研究生论文 温热化疗对大肠癌细胞的作用及其对肿瘤细胞内}IsP70表达的影响 前言 腹腔温热化疗作为进展期胃癌和大肠癌重要的辅助疗法，在日本和西 方国家已广泛应用。应用腹腔温热结合化疗治疗各种原发肿瘤引起的腹腔 内种植和腹膜肿瘤复发的临床可行性已被世界上多个研究小组所证实u…， 其临床疗效令人满意¨11。 ． 温热化疗的作用机制： (1)热效应使肿瘤细胞膜的通透性增加，有利于化学药物的渗透和吸 收；(2)热效应能使化疗药物的摄取和反应速度加快，可减少断裂DNA的修 复；(3)热效应通过增加肿瘤及其周边的血供来提高肿瘤组织的化疗药物 浓度；(4)热效应使肿瘤组织呈低PH值状态，此时化疗效果更明显；(5) 热效应改变药物的细胞毒性作用，使得部分在37℃时无细胞毒性的药物变 得有毒性；(6)热效应能改善和增强人体微循环功能。肿瘤患者普遍存在 不同程度微循环功能障碍；这种障碍除直接影响化疗药物达到肿瘤组织， 还影响组织的物质补给，热疗改善微循环势必增加肿瘤组织药物浓度起到 间接增效作用；微循环的改善各脏器功能也得以增强，就有效的提高了脏 器对化疗损伤的承受能力。(7)热效应可以降低血粘度，提高红细胞携带 氧的能力等作用。这些改变可减少血液的循环阻力，增加流量特别是组织 的灌注量，有利于化疗药物到达瘤组织，同时对受化疗药物损伤的组织的 修复极为有利。(8)热效应还有增强人体全免疫功能的作用。化疗药物在 杀伤肿瘤细胞的同时，也损伤机体的免疫功能；而肿瘤的存在对机体功能 也是抑制的，这种抑制与肿瘤的大小、病程长短呈正相关；随着热疗对肿 瘤细胞的灭活，这种抑制得以缓解：所以从免疫学角度看热疗与化疗联合 应用具有增效减毒作用。 但在应用过程中也发现，随着加热温度的增加，热疗效果反而下降， 2005级硕上研究生论文 图3 响影的达表07PsH内胞细瘤肿对其及用作的胞细癌肠大对疗化热温 cT26移植瘤病理图 下镜倍01×01 2005级硕士研究生论文 温热化疗对大肠癌细胞的作用及其对肿瘤细胞内HSP70表达的影响 体外实验部分 一、实验仪器和材料 ∽主要试剂 5一FU 江苏南通精华制药有限公司 MTT粉剂(二甲基噻咪二苯四唑溴盐)SIGMA公司 TRIZOL Invitrogen公司 逆转录试剂盒 Fermentas公司 GAPDH内参引物 上海生工公司 HsP70弓I物 上海生工公司 ㈢主要器械 5810R) 低温高速离心机(Eppendorf 德国 PCR匆‘增仪(MJPTc一220) 美国 全自动凝胶成像分析系统(Bio—Rad)美国 紫外分光光度仪(uv—1700) 日本 酶标仪(埘(3) 芬兰 删一5数显恒温水浴箱 江苏金坛市医疗仪器厂 二、方法 2．1细胞培养及分组 规培养。取对数生长期的细胞，经0．25％胰酶消化后制成细胞悬液，接种于 3小时)分成六组，将六组细胞分别给予化疗(5一FU)、热疗和温热化疗处 理，另设一阴性对照组放入5％、37℃的cO：培养箱中培养。加热温度分别设 11 2∞5级硕士研究生论文 温热化疗对大肠癌细胞的作用及其对肿瘤细胞内IIsP70表选的影响 达情况。 2．2MTT法检测细胞抑制率 h后进行MTT(5 细胞贴壁后，按实验各个分组处理后换液，待48