脑心通胶囊对VD模型大鼠海马神经元静息态%5bCa-%272%2b-%5d-%2ci-及pCREB蛋白表达的影响.pdf

原创性声明 本文声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不 包含其他人已经发表中撰写过的研究成果，也不包含为获得中南或其他单位的 学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在 论文中作了明确的说明。 作者：銎丝 日期：盟年—￡月二之曰 关于学位论文使用授权说明 本文了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学 位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内 容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文；学校可根据国家或湖南省 有关部门规定送交学位论文。 作者签名：缒导师签名存再瑚垒目期：三堕年—生月三生日 硕士学位论文 刖 声 血管性痴呆(Vascular 临床综合征，它是仅次于老年性痴呆(AlzheimerDisease，AD)的第二位常见的痴呆， 约占所有痴呆的10％．50％。随着社会人口老龄化和脑卒中治疗存活率的提高，VD 的发病率愈来愈高。在美国，卒中后存活者中认知损害发生率为26．3％111，我国VD 的致残率高达75％，其中30％一40％的脑梗塞者有不同程度的认知障碍，给社会和家庭 带来了沉重的经济和精神负担。尽管VD的发病率低于AD，但从临床实际意义而 言，VD可能较AD更有预防和治疗价值，因而对VD的研究近来备受重视。 VD的病因和发病机制复杂，目前仍不完全清楚，因而尚无有效性和特异性强的 治疗药物。目前西医治疗用药主要有脑血循环改善剂、脑能量代谢激活剂、促进胆 碱能系统的药物、兴奋性氨基酸受体拮抗剂等，用于改善痴呆症状。其中许多药物 还处于实验研究阶段，疗效还未明确。中医药具有多靶点效应的作用特点，成本低， 副作用少，因此研究中医药治疗血管性痴呆具有重要的意义。 脑心通胶囊临床治疗缺血性脑卒中效果肯定，亦有人将其扩展应用于VD的治 疗【2】，发现脑心通胶囊对VD的智能及其中医主症均有改善作用。钙离子作为细胞内 重要的第二信使，参与了学习记忆的神经基础一突触传递长时程增强(Long．term 录，是参与长期记忆形成的关键因子。本课题采用MCAO法制作VD大鼠模型，用 脑心通胶囊对VD动物模型进行干预，观察中药对VD大鼠的行为学、海马组织形态 学、海马神经元静息态【Ca2+】i及pCREB蛋白表达的影响，为脑心通胶囊l临床治疗 VD提供实验依据，并对其作用机制进行初步探讨，为中医药抗痴呆理论的研究拓 宽思路与方法。 硕士学位论文 第一章 第一章脑心通胶囊对VD模型大鼠行为学 和海马组织形态学的影响 1．材料与方法 1．1实验动物及分组 中南大学湘雅二医院动物实验室提供，合格证号：(湘)2004--0013。动物自由饮水 和进食，每日光照不少于12小时。 将50只大鼠完全随机分为5组(随机数字表法)：正常组(10只)、假手术组(10 只)、模型组(ao只)、中药组(10只)和西药组(10只)。 1．2实验药物 脑心通胶囊(药粉)为实验药物，19药粉相当于19生药，由咸阳步长制药有限公 司生产，实验时用双蒸水配成浓度为0．059／ml的混悬液。喜德镇为阳性对照药物， lmg／片，系天津华津制药厂与北京诺华制药有限公司合作产品。将药片碾碎溶于双 蒸水制成浓度为0．0625mg／ml的混悬液。药物配制后置4C冰箱保存备用，用前摇匀。 1．3动物模型的建立 参照尹军祥等人的方法。1略加改进复制血管性痴呆大鼠模型。线栓采用直径为 0．237mm的尼龙鱼线，头端覆以指甲油，距头端2cm处作标记。以10％水合氯醛 (0．35ml／lOOg体重)腹腔注射麻醉大鼠后，将其腹卧位固定于手术板上，以络合碘消 毒颈部皮肤。行颈部右侧切口，于胸骨舌骨肌与胸骨甲状肌间分离出右颈总动脉 ICA远心端后，于CCA分叉处下端迅速作一切口，从切口处插入线栓。线插入ICA后， 于入口处稍稍结扎尼龙线与入口处CCA段，然后松开夹闭ICA的动脉夹，继续插入 尼龙线至稍有阻力后略回撤，至线插入深度为18～20mm左右，实现大脑中动脉