C1C-3蛋白及血管平滑肌细胞容积调节性氯通道关系及其对Ca-%272%2b-运动影响.pdf

CIC一3盘fl’J帆管、卜滑舭细胞靠极蹦箝朴氯通道的天不及jI对cd’延功的蟛响中文摘美 激活的】cl。l和If}．fl(。亦无明显影响。 小 结 1 A10细胞存在容积凋节性氯通道。 2 达明显增加，同时细胞容积调节性氯电流增强。低渗激活的CIC．3氯通道电流的 生物物理学和药理学特性与A10细胞低渗溶液激活的氯电流相同。 3 容积调节性氯电流。胞内透析抗CIC．3抗体可完全取消低渗激活的CIC．3氯通道 和A10细胞内源性容积调节性氯通道电流。 4 PKC和蛋白酪氨酸磷酸化信号通路参与调控CIC一3氯通道和A10细胞内源性 容积调节氯通道的开放，且对两者的作用无差异。 以上结果提示，在A10血管平滑肌细胞上C1C．3氯通道参与了细胞容积调节功 能，是容积调节性氯通道的分子基础。 第二部分AIO细胞a，肾上腺素受体激活的Ca2+内流通路及不同 Ca2+通道阻断剂的作用 ca2+内流及SOCC电流，以 采用thapsigargin(TG)激发SOCC phcnylep¨ne(Phe)触发ROCC 定A10细胞上ROCC和SOCC Ca2+内流和膜片钳全细胞记录技术记录ROCC和 体Rd对它们的作用。结果表明： 1 Ca2+池ca2+泵抑制剂TG和o1．肾上腺素受体激动剂苯肾上腺素(Phe)均可 引起【Ca2+】j升高。当保持电位为，60mV时，TG在A10细胞可激活一内向电流， 该电流可被三价阳离子Gd”和细胞外0Na+／0ca2+溶液所抑制。与TG作用相似， 保持电位为．60mV时，Phc在A10细胞亦可激活一内向电流，该电流可被d．．肾 上腺素受体拮抗剂酚妥拉明和三价阳离子Gd3+以及细胞外0Na+／0ca2+溶液所 V CIC．3蛋臼’。l由管、卜滑帆细艇容根渊锚忭氯通道的天系及}￡WCa。运动的蟛啪 中文摘费 抑制。证实A10细胞上存在有SOCC和ROCC。 u 2在无Ca2+BSS缓冲液中，l 瞬时性列i笥，随后：flIl入10um01．L。Phe-未见[Ca”l进一步变化。但在缓冲液中含 ut001．L。TG作用达平台后 1．5mmo】．L。Ca2+和l“m01．L。nifedipine的条件。F，I u u 再加入10m01．L。Phe仍可进‘一步引起ca”内流。膜片钳的结果显示，在l m01．L。TG激活SOCC电流的基础上加入10tJm01．L。Phe仍能进。步激活一内 u 向电流。随后加入1 m01．L。a。．肾上腺素受体拈抗剂酚妥拉明可完全抑制Phe 激活的内向电流。提示此基础上Phe弓I起Ca”内流和内向电流是a，一’肾上腺素受 体激动后通过不依赖于SOCC通路所引起。 3 lam01．L4SKF96365呈浓 Nifedipine对SOCC和ROCC电流无影响。2．5-40 度依赖性地抑制lktm01．L。TG和l0u 2．5．40um01．Lo H 对SOCC和ROCC电流的最大抑制浓度为20mol，L～，各浓度点对sOCC和 ROCC电流的抑制作用无差异。 p pt001．L-1 H 5．80t001．L。人参皂甙．Rd呈浓度依赖性地抑制l TG和lO 1．3％、 ±8．6％；对ROCC电流的抑制率分别为14．2±4．8％、44．5±9．O％、65．0±1 79．6±10．70／o$n la u 度为40m01．L～，Rd对