金属离子对DNA结构影响喇曼光谱的研究.pdfVIP

HⅡ再 刖茜 DNA双螺旋的弯曲和变形在DNA一蛋白质的识别、基因的表达和遗传方面起着 重要的作川。近年来，DNA的构象变化、浓缩特性以及动力学特性成了研究的热点， 而对金属阳离子跟DNA相互作用的研究更是热点之中的热点。Razmiafshari曾利 用缩氨酸与cr形成的配合物间接研究cd”与DNA的相互作用，发现c矿能以高的 亲和力结合到双螺旋DNA上；陈霞用不同的方法研究了单一浓度cd2-诱导DNA构象 的变化，得出DNA由B型变成了A型：花尔并等人得出：由于c∥与Poly(I：c)的 和Helmut等从理论上分析了zn”跟DNA各组成成份之间结合所需的能量、两者之 问结合的键长、键角大小的变化等；郑文竹则着重分析了在温度变化下，zn”对DNA 情况下能促使DNA变性；柯德森等研究了维生素c·Cu·菲咯啉系统对DNA的定位 有关金属配合物跟DNA相互作用方面的研究等等。 纵观国内外的文献及综述，发现所有这些研究基本上都只是着重讨论了当温 度不同或DNA碱基对数目不同或在Me2+浓度单一的情况下，金属离子跟DNA之 间相互作用的情况，而对于在恒温(或基本不变)下，同种金属离子在不同浓度情 况下，不同利t金属在不同浓度下对DNA构象变化影响的却未见报道。为深入了解 Me”对DNA的影响情况，了解多大浓度的Me2+才会对DNA造成损伤以及不同金属离 子在不同浓度下对DNA的损伤情况，更好地掌握金属离子对DNA的损伤作用，防治 由金属离子引起的疾病，我们设计了一套实验方案，利用喇曼光谱技术来研究和 分析金属离子对DNA结构的影响情况，以期找到金属离子对DNA损伤的浓度闽值。 本文主要介绍了喇曼光谱技术的基本原理及装置，汇报了金属离子对DNA结 构影响的实验研究结果，并分别对这两种金属对DNA结构的影响进行了详细地分 析和讨论，初步得到一些结论。论文最后简单介绍了喇曼光谱技术的应用前景， 并对今后的研究作出展望。 第1章金属离子对DNA的毒害性及研究意义 第一章金属离子对DNA的毒害性及研究意义 重金属在地球上是广泛存在的，它们对于高等动物而言，一半认为是必需的 元素，但尽管这些金属元素跟人体的营养作用有关，但是大多数金属离子都带有 毒性，当其在人体内的浓度超过一定的值后，它就会对人体产生毒害性。近年来 在环境科学巾，重金属对于生物(特别是人)的影响已经成为重要的科研课题， 并且几乎毫无例外的以重金属过剩引起的危害作为研究的课题。本章简单地介绍 了DNA的。1些基本情况，特别重要地叙述了金属离子的毒害性及研究意义。 §1．1 DNA简介 1944年，艾弗里(O．T．Avery)…等人的著名的肺炎球菌转化试验确立了DNA 是主要遗传物质。紧接着，郝尔歇(A．D．Hershey)。1等人用同位素标记法进一 互补的概念。这一极其重要的发现，为以后Watson-Crick建立DNA双螺旋结构模 型提供了重要依据。1953年DNA双螺旋结构模型的提出，被认为是20世纪在自然 科学中的重大突破之一9。“。分子生物学所取得的突飞猛进的发展与DNA双螺旋结 构模型的建立是分不开的。 1．1．1碱基之间的关系 20世纪40年代后期，Chargaff等应用纸层析及紫外分光光度计得出各种生物 DNA的主要四种碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶)的组成之问有着不同 的碱基比例，不同碱基在数量上是紧密相关的，并得出如下规律【3,4】： (1)所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等，即[A]=IT]；鸟嘌呤与 胞嘧啶的摩尔含量相等，即[G]=[C]。因此，嘌呤的总含量与嘧啶的总含量相等， 即[A]+[G]=[C]+[T]。 (2)不同生物种的DNA具有自己独特的碱基组成比例(又称不对称率比率 dissymmetry DNA的碱基组成相似，即不对称比率相近。 2 第一章金属离子对DNA的毒害性及研究意义 (3)同一种牛物DNA的碱基组成没有组织和器官的特异性。 1．1．2二级结构 在不同湿度和盐浓度下，DNA的双螺旋可采取不同的构象，呈现这些构象类型 Z-DNA： (1)B-DNA的结构特征(见图I．I)“” 1．两条反向平行的多核苷酸链围