超声提取－HPLC法测定秦艽中龙胆苦苷的含量-西北大学.PDFVIP

维普资讯 西北大学学报 (自然科学版) 2004年 2月 ，第 34卷第 1期 ，Feb．，2004，Vo1．34，No．1 JournalofNo~hwestUniversity(NaturalScienceEdition) r JNWU 超声提取-HPLC法测定秦艽 中龙胆苦苷的含量 郝保华，孙文基 ，支朝晖，王玉英 (西北大学 生命科学学院／生物医药重点实验室，陕西 西安 710069) 摘要：目的 用高效液相色谱法测定秦艽样品中龙胆苦苷的含量。方法 采用水提法为对比，以 水、乙醇和 甲醇为溶剂，用频率为20kHz的超声波提取秦艽中的龙胆苦苷，并用HPLC法测定样品 中龙胆苦苷的含量，并对两种工艺的秦艽样品的主体成分龙胆苦苷进行定量 比较。结果 表 明超 声提取能够明显地提高秦艽中龙胆苦苷的浸出率。结论 通过运用正交试验法，确定了秦艽的粒 径大小(目数)、超声波处理时间(min)以及水剂量(mL)3个因素的最佳组合。 关 键 词：秦艽；龙胆苦苷；超声波；HPLC 中图分类号：R284．2 文献标识码 ：A 文章编号：1000-274X(2004)01-0081-04 秦艽 (GentianaMacrophyllaPal1)为龙胆科植 分有效溶出，同时也可能破坏有机分子结构而降低 物 ，多年生草本。主根粗长 ，圆锥形 ，上粗下细 ，扭曲 浸 出率。 不直 ，有少数分枝 ，其 中部多呈罗纹状 ，根头部有许 多纤维状残存 叶基 。根味苦 、辛 ，性平。能祛风 1 实验部分 湿 ，清湿热 ，止痹痛 。用于风湿痹痛 ，筋脉拘挛 ，骨节 酸痛 ，日晡朝热 ，小儿疳积发热等 。 1．1 主要仪器及试剂 化学成分：根 中含有秦艽碱 甲、秦艽碱 乙、龙胆 高效液相色谱仪(USABECKMANCOULTER)； 苦苷、糖类及挥发油。本实验以龙胆苦苷含量为试 紫外检测器 (SYSTEM GOLD 125Solvent，SYS． 验指标 。龙胆苦苷能够促进 胃液分泌 ，使游离酸增 TE MGOLD168Detector)； 加 ；抗原虫 ，对疟原虫有较高毒性 ，可用于疟疾 ；抗 YCQ-300超声波清洗器(上海凯波超声设备有 炎，对角叉菜胶引起的大 鼠足趾水肿有抑制作用。 限公司)； 龙胆苦苷化学式为 C。H．90。，相对分子量 356．32。 秦艽 (采 自陕西陇县 ，经西北大学永和公司鉴 超声波工作原理 ：由超声波发生器所发 出的高 定为龙胆科植物 (GentianamacrophyllaPal1)； 频振荡讯号，通过换能器转换成高频机械振荡而传 纯净水 (乐百氏公司)； 播到介质溶液中，超声波在溶液 中疏密相 同地 向前 甲醇 (分析纯 ，XK13．201-0257-011(2)西安化学 辐射，使液体流动而产生数以万计的微小气泡，这些 试剂厂)； 气泡在超声波纵 向传播形成的负压区形成、生长，而 乙醇 (分析纯 ，XK13．201-0257-037(2)西安化学 在正压区迅速闭合 。在这种被称为 “空化效应”的 试剂厂)。 过程 中，气泡闭合可形成超过 1000大气压的瞬间 1．2 色谱条件 高压，这样连续不断产生的高压就像一连 串小爆炸 色谱柱 ：USAULTRASPHEREODSdp(5 4．6 不断地冲击物体表面 ，使物体表面及缝 隙中的可溶 mm ×25mm)；流动相 ：甲醇 一水 (3：7)；紫外检测 性物质迅速溶出 J。 波长254nm。多次试验证明，在上述流动相和波长 因此 ，超声波处理秦艽粉末，能够破坏秦艽细 下出现的峰最 明显 ，流动相流速 1．0mL／min25cc， 胞 ，使溶媒能够渗透到细胞 中，从而使其中的化学成 进样量 20 L。 收稿 日期 ：2002-11-1