农杆菌介导鼠源轮状病毒vp4基因转化马铃薯条件优化研究.PDF

维普资讯 第 24卷第 10期 第 二 军 医 大 学 学 报 Vo1．24．No．10 2002年 10月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILrrARIS TER|rIAE 0(-t．2002 ll49 丈章编号：1000—5404(2002)10—1149—04 论著 农杆菌介导鼠源轮状病毒 vp4基因转化马铃薯条件优化研究 李晋涛，吴玉章．费 蕾，牟芝蓉 (第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所，重庆4ooo38) 提 要 ：目的 获得马铃薯再生和农杆菌介导的遗传转化体系 方法 以马铃薯品种 “台湾红”为受体材料，埘其再生和农杆 菌介导的遗传转化体系进行 了研究。结果 诱愈培养基 为MS+0．1mg／L2．4一D+1mg／LBA．出芽培养基 为 Ms+1mg／LZT+ 5．0mg／LGA3，卡那霉素浓度为50mg／L，农杆菌液浓度为 A =0．5：通过该体系将一 鼠源轮状病毒外壳蛋白基因vI)4导人马铃薯 中，获得了具卡那霉素抗性的转化植株。经PCR验证 ，外源基因已导人马铃薯基因组 中。结论 获得相对高效的马铃薯遗传转化 体系 ，并成功地将外源基因转入马铃薯中。 关键词：基因转化；农杆菌；马铃薯；鼠源 vp4 中图法分类号 ：Q78；Q933 文献标识码 ：A Optimalconditions for transforming murine vp4 gene into potatoes induced by Agrobacteriumtumernfaciens U Jin—tao，WUYu—zhang，FEILei，MOUZhi—rong (Instituteoflnmmnolog?ofPIA，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038，China) Abstract：Objective Too~ainasystemoftransfomlingforeigngeneintopotatoeswithregeneratingability．Methods Apotatocuhivar“tai— wanhong”~nsitivetoAgrobacterium tumerfaciens，wasusedasthetransformationreceptor．A regeneration system andatransformation system 、ia Agrobacterium tumerfacienswerestudied．Results rheoptimal conditionsforregenerationandtransformationofrforeigngeneintopotatowerelisted asfollowing：thecallusinducementmediwlt：MS+0．1mg／[2，4一D + 1mg／LBA：thebuddingmedillm：MS+ 1mg／LZT+5．0mg／LGA3；ka— namycinconcentration：50me／L；thebacterialeoneenrtation：A㈣ 0．5．Ainurinerotavimsoutercapsidproteingenevp4Wasintroducedintothe potatoundertheconditionasabovementioned．PCR naalysisofthekanamycin—resistanttransformantsmmfifestedthattheforeing geneWas integrated intothepotatogenome．Conclusion Ahigheffectivegeneticrtansfomrationsystem isobtainednadsuccessfullyusedintmnsofmlingtheforeing gene intopo tatoes． Keywords：genetrnasfomr ation；Agrobacterium tumerfaciens；potato；inurineoutercapsidproteingenevp4 转基