植物生理学试验理论.PDF

植物组织培养技术 植物组织培养（plant tissue culture ）： 是指在无菌条件下，将离体的植物器官 （如根、茎、叶、茎尖、花、果实 等），组织（如形成层、表皮、皮层、 髓部细胞、胚乳等），细胞（如大孢子、 小孢子、体细胞等）以及原生质体，在 人工控制的环境里培养成完整植株的一 门生物学技术。 植物组织培养的理论依据：植物细胞全能 性。 植物细胞全能性（totipotency）：指植物 的每个细胞都包含着该物种的全部遗传 信息，从而具备发育成完整植株的遗传 能力。在适宜条件下，任何一个细胞都 可以发育成一个新个体。 一植物组织培养一些的概念 外植体（explant）：在植物组织培养过程中，从 植物体上被分离下来的，接种在培养基上，供 培养用的原生质体、细胞、组织、器官等成为 外植体。 愈伤组织（callus）：植物受伤后的伤口处或在 植物组织培养中外植体切口处不断增殖产生的 一团不定形的薄壁组织。愈伤组织可使伤口愈 合，使表面细胞呈木栓化而起到保护作用；植 物扦插时，愈伤组织可形成不定根；植物嫁接 时，愈伤组织可使接穗和砧木愈合；在植物组 织培养中，愈伤组织常可形成不定芽。 脱分化（dedifferentiation）：指已分化的组织 又恢复到无分化的状态。在组织培养过程中，将 已经分化的茎、叶、花等外植体进行培养，令其 形成愈伤组织，回到没有分化的状态，称为脱分 化。 再分化（redifferentiation）：指在植物组织培 养中，对处于脱分化状态的愈伤组织进行培养， 诱导其形成新的植物体的过程。 植株再生（plant regeneration）：指通过 组织培养技术将植物的细胞、组织、器官 培养成完整植株的过程。 试管苗（test-tube plantlet）：指在无菌 条件下的人工培养基上，对植物细胞、组 织或器官进行培养所获得的再生植株。 植物组织培养架和组培苗 组培愈伤组织 初代培养（primary culture）：指在组织 培养过程中，最初建立的外植体无菌培 养阶段。由于首批外植体来源复杂，携 带较多细菌，要对培养条件进行适应， 因此，初代培养一般比较困难。 继代培养（subculture）：在组织培养过 程中，当外植体被接种一段时间后，将 已经形成愈伤组织或已经分化根、茎、 叶、花等的培养物重新切割，转接到其 它培养基上以进一步扩大培养的过程称 为继代培养。 运用组织培养方法可以在比较简单易观 察的条件下研究细胞、组织或器官的繁殖、 生长和分化，以及各种外界因素对它们的影 响，从而为解决农业生产和药物生产中的某 些问题开辟了广阔的前景。目前已有若干重 要成果应用于生产实践中，一为营养繁殖系 的快速繁殖，如以甘蔗为例；原来每亩要用 蔗种0.5～1吨，用组织培养快速繁殖的幼苗 进行栽培可节省大量蔗种。又如贝母繁殖率 非常低，而用组织培养分化出的三个月左右 的鳞茎，其大小就相当于用种子繁殖二年生 的鳞茎。 另一为药物和生物制品的工业生产，探索 天然药物生产工业化的途径是当前药物生产 的一个新方向，有可能用组织培养法来代替 全植物提取有效成分。组织培养应用在药学 方面的工作虽然历史不长，但发展很迅速， 它具有如下一些优点： 1．利用组织培养代替原植物的栽培以获得 所需的有效成分，达到产量高，成本低的目 的，还可节约土地。 2．除了应用于产生次生物质外，还可应用 于生物转化。例如烟草组织培养中蒂巴因去 甲基后可能生成吗啡。 目前中国已成功地将麦角菌、灵芝、猴 头菇等真菌进行工业化生产，高等植物组织 培养在工业化中的应用也正在研究。 总之，植物组织培养这一新技术在中草药 方面应用的前途是无限广阔的，它不仅有利 于探讨和阐明药用植物生理、遗传和成分生 物合成等一系列理论问题，而且一旦工业化 生产问题得到解决，将可以为防病治病做出 很大的贡献。 一、培养基的组成和配制法 1 培养基的成分 （1）无机营养物 （2 ）有机物质 （3 ）植物生长刺激物质 （4 ）其它附加物 （5 ）其它对生长有益的未知复