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　　探讨植物保护学科前沿论文 探讨植物保护学科前沿论文_论文范文导读： 成绩 中国农业大学 课程论文 论文题目： 分子生物学技术在昆虫分类中的应用 课程名称：植物保护学科前沿 任课教师： 班 学 姓 彭友良 级： 植物保护 11 班 号： 名： S卫玉锋 分子生物学技术在昆虫分类中的应用摘要： 随着科学技术的发展,生物技术已越来越多地被应用在昆虫分类学研究中。 本文概述了核酸序列分析、 RAPD、RFLP、分子杂交、SSCP及DSCP等生物技术在昆虫分类研究中的应用情况,并展望了分子生物学技 术在昆虫分类研究中的前景。 关键词:分子生物学技术;昆虫分类 目前,已经定名的昆虫有100多万种,占已知动物的2 /3,但是全世界仍约有90%的昆虫是未知种[1] 。 随着 科学技术的进步以及各个学科的交叉渗透,已有200多年历史的昆虫分类学也获得了极大的发展,特别是现 代生物技术的应用更加速了昆虫分类学发展的步伐。 长期以来,昆虫分类主要是以外部形态特征为依据。 因 为外部形态特征较为直观,且容易掌握,而根据昆虫的形态特征作为分类依据在目等分类单元中可以很好的 反映物种的分类地位。 但是,在小的分类单元,如属、族、种内则不容易确定物种的分类地位,再到种群、生 态型则更难确定分类地位。 20世纪70年代以来,先后出现了核酸序列分析、随机扩增多态性DNA (RAPD) 、 限制性片段长度多态性(RFLP) 、分子杂交技术、单链构象多态性(SSCP)及双链构象多态性(DSCP)技术 等多种现代分子生物学技术,极大的促进了昆虫分类学的发展。 1 研究及应用现状1.1 核酸序列(线粒体DNA和核糖体DNA)分析技术线粒体DNA为双链闭环分子。 昆虫的线粒体DNA大小为1514～1613 kb,其中含有编码2个核糖体RNA (12S rRNA, 16S rRNA) 、22个t RNA、1个细胞色素b、3个细胞色素氧化酶(CO I、CO II、COIII) 、6个NADH 降解酶(ND 1～6)和2个ATP酶(6和8)的基因 rRNA、细胞色素b、ND2、COI、CO II等。 潘兴丽等以线粒体细胞色素b (Cyt b)基因作为分子标记,首次对缘蝽科4亚科14种昆虫进行序列测定, 获得Cyt b基因412 bp 的序列片段。 以筛豆龟蝽为外群构建系统发育树,表明在亚科级关系上,姬缘蝽亚科 最原始,蛛缘蝽亚科次之,巨缘蝽亚科和缘蝽亚科亲缘关系较近 分歧及相似性,同时建立其系统发育关系[4] [3] [ 2 ] 。 目前,通常用于昆虫分类研究的基因有以下几种: 16S 。 姚银花等通过对我国大螟S esam ia inferens 9 个地理种群的线粒体DNA CO II基因的测序,并分析了大螟不同地理种群之间的CO II序列的遗传 。 核糖体DNA是编码核糖体RNA的基因,是一类中度重复的DNA序列,以串联多拷贝形式存在于染色体DNA 5 探讨植物保护学科前沿论文_论文范文(2)导读：一项DNA分子水平上的大分子多态检测技术。其原理是用随机序列的9-10个核苷酸的引物对基因组的DNA进行PCR扩增,再进行电泳分离与溴化乙锭染色。RAPD技术具有简便、快捷、灵敏、多态性检出率高、所需DNA量少等特点,因此被迅速用于个体和品系鉴定、基因的多态分析、基因定位、构建遗传图谱、标记辅助选择和种间遗传分析 中。 每个重复单位由非转录间隔区 (NTS) 、转录间隔区( ITS)和3 种RNA ( 18S、518S、28S RNA)基因 编码区组成[ 5 ] 。 由于rDNA是生物界普遍存在的遗传结构,具有多拷贝性、编码区保守、转录间隔区中度[6] 保守等优点,因而在个体及群体内有较好的均一性,少量样品能有效代表其群体的rDNA的变异情况。 因 此, rDNA已成为生物系统进化研究中一个非常有用的分子标记 。 Flook和Ros和加利福尼亚生物研究所Welsh两个研究小组在1990发 展起来的以PCR为基础的一项DNA分子水平上的大分子多态检测技术[ 9 ] 。 其原理是用随机序列的9 - 10个 核苷酸的引物对基因组的DNA进行PCR扩增,再进行电泳分离与溴化乙锭染色。 RAPD 技术具有简便、快 捷、灵敏、多态性检出率高、所需DNA量少等特点,因此被迅速用于个体和品系鉴定、基因的多态分析、 基因定位、构建遗传图谱、标记辅助选择和种间遗传分析等领域的研究。 目前RAPD技术已成为昆虫遗传 图谱构建中的一种普遍方法,该技术一出现,就被用于蚊虫的分子系统学研究。 南宫自艳等采用RAPD技术,分析了5种松毛虫10个地理种群的种群内、 种群间的遗传多样性,检测和描述 在不同地理环境条件下的松毛虫种群的遗传结构和变异情况,为松毛虫的综合