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核酸药物的研究与应用 摘要：核酸药物是各种具有不同功能的寡聚核糖核苷酸(RNA)或寡聚脱氧核糖核苷酸(DNA)，主要在基因水平上发挥作用。一般认为，核酸药物包括Aptamer、抗基因(Antigene)、核酶(Ribozyme)、反义核酸(Antisencenucleic acid)、RNA干扰剂。由于其具有特异性针对致病基因，也就是说具有特定的靶点和作用机制，因此核酸药物具有广泛的应用前景。本文就核酸药物的分类简要介绍核酸药物及其研究进展。 关键词：核酸药物 定义 分类 应用 现状 核酸类药物作为药物以低毒性不生产抗药性疗效快等特点被广泛应用于临床。 1 核酸药物的定义 核酸药物又称核苷酸类药物。由某些动物、微生物的细胞中提取出的核酸(包括核苷酸和脱氧核苷酸)，或者用人工合成法制备的具有核酸结构(包括核苷酸和脱氧核苷酸结构)同时又具有一定药理作用的物质称为核酸药物或核酸类生化药物。广义的核酸药物可包括核苷酸药物、核苷药物及含有不同碱基化合物的药物[1][2]。 2 核酸药物的分类 2.1分类[2] (1)具有天然结构的核酸类物质；(2)天然碱基、核苷、核苷酸的类似物或聚合物。 2.2 根据药理作用不同的分类[2-4] (1)抗病毒剂，代表药物有三氮唑核苷、无环鸟苷和6可糖腺苷等，临床上用于抗肝炎病毒、疱疹病毒及其他病毒；(2)抗肿瘤剂，代表药物有用于治疗消化道癌的氟尿嘧啶以及用于治疗各类急性白血病的阿糖胞苷等；(3)干扰素诱导剂，代表药物为聚肌胞，临床上用于抗肝炎病毒、疱疹病毒等；(4)免疫增强剂，主要用于抗病毒及抗肿瘤的辅助治疗；(5)供能剂，用于肝炎、心脏病等多种疾病的辅助治疗。 2.3 根据靶位点和作用机制的不同的分类： 2.3.1 反义核酸 反义核酸是指能与靶基因或其转录物精确互补，特异阻断其翻译的RNA或DNA分子[5]。利用反义核酸特异地封闭某些基因表达，使之低表达或不表达，这种技术即为反义核酸技术[6]。包括反义RNA、反义DNA和核酶(ibozymes)三大技术。其作用机制为异体杂交，阻止翻译或发挥RNaseH活性。反义核酶作为一种基因下向调节作用因子，在抑制一些有害基因的表达和失控基因的过度表达上发挥着重要作用。随着反义核酶技术的发展和成熟，已逐渐应用于抗某些人体寄生虫病的研究[7]。 2.3.2 核酶 核酶（ibozyme）是具有催化功能的RNA 和DNA，分别称为酶性RNA 和酶性DNA，两者统称核酶(Nucleozyme)。核酶能催化裂解靶RNA共价键的RNA[8]。作用机制是异体杂交，切割、降解靶物质。理论上通过人工设计，核酶可以从mRNA 水平对活体细胞内的任何基因进行灭活，从而调控相应蛋白的表达，以达到治疗疾病的目的[9]。目前对于核酶治疗癌症等的研究较多[10][11]。王祎琴等利用小发卡状RNA单独及联合脱氧核酶对鼻咽癌细胞中EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1) 基因表达的抑制作用进行研究。研究发现，小发卡状RNA联合脱氧核酶能够提高抑制膜蛋白1基因表达的效率，为探讨联合基因治疗在鼻咽癌基因治疗中的可行性提供实验基础[12]。血管内皮生长因子（VEGF）的过表达在肿瘤组织血管形成中起着重要作用，大多数结肠癌组织的VEGF 存在过表达。常树建等成功构建了抗VEGF发夹状核酶腺病毒载体，其对人结肠癌HT29 细胞感染率可达80%，并对其VEGF的表达有明显的抑制作用[13]。抗VEGF发夹状核酶在卵巢肿瘤细胞及移植瘤上也一定的抗肿瘤作用[14]。 2.3.3抗基因核酸化合物 抗基因核酸化合物(Antigene nucleic acid compound )能与基因组在复制泡或转录泡处结合, 对这两个过程都有影响, 但只对转录过程的影响具有基因特异性[15]。抗基因也可以结合在双链DNA 的大沟处, 形成三螺旋或三体,阻止转录所需的各种蛋白质因子与DNA的结合, 或转录复合物的启动和延长。目前发现的抗基因大多都是DNA[16]。Roy 等人设计了与干扰素表达调控元件特异性结合的寡核苷酸，可抑制干扰素的表达[17]。表明，β-arrestin2 有望成为抑制吗啡耐受的形成以及逆转吗啡耐受状态的有效靶点。高峰等人构建携带β-arrestin2抗基因RNA 的表达载体可有效下调NG108215 神经细胞β-arrestin2的表达，实现基因沉默效应[18]。 2.3.4 Aptamers Aptamer指的是能与蛋白或其他小分子物质结合的单链或双链寡核苷酸[19]。尽管Aptamers 结合的是蛋白质它所调控的是基因的表达。用作核酸药物的Aptamers所结合的蛋白质主要是与基因表达调控有关的蛋白质如转录因子防碍蛋白质发挥正常的生理功能继而影响该蛋白所调控的基因的表达[20]。体外筛选技术的发