丹酚酸B摄取机制研究.docVIP

中国药科大学2012届本科生毕业论文（设计） PAGE 20 中国药科大学 本 科 毕 业 论 文 论文题目 丹酚酸B摄取机制研究 英文题目 the uptake mechanism of Salvianolic acid B in vitro 专 业 食品质量与安全 院 部 药学院 学 号 0842910 姓 名 马亭 指导教师 陈西敬 教授 课 题 完成场所 中国药科大学药物代谢研究中心 论文工作时间： 2012 年 3 月 至 2012 年 5 月 丹酚酸B摄取机制研究 目录 摘要…………………………………………………………………… 3 前言…………………………………………………………………… 5 人胚肾细胞（HEK293）的培养与转染…………………… 7 试验试剂与试验仪器以及试剂配制………………………… 7 细胞复苏、传代与计数……………………………………… 8 质粒的制备与转染…………………………………………… 9 高表达OATP1B1的细胞模型验证……………………………12 试验试剂与试验仪器………………………………………… 12 用荧光素验证细胞模型……………………………………… 13 丹酚酸B的摄取实验…………………………………………19 试验试剂与试验仪器……………………………………………… 浓度依赖性试验…………………………………………………… PH依赖性试验………………………………………………… 试验讨论………………………………………………………… 试验讨论…………………………………………………………… 参考文献………………………………………………………………19 致谢……………………………………………………………………20 附录Ⅹ…………………………………………………………………… 丹酚酸B摄取机制研究 0842910 马亭 摘要 药物转运体是存在于细胞膜上的一类功能性蛋白或多肽，通过将药物摄取或外排出细胞而影响许多药物在体内的动力学过程。在本实验中我们通过从大肠杆菌中提取质粒，并用紫外分光光度法测定其纯度后，转染入人胚肾细胞（HEK293）中，让质粒在细胞中成功表达，从而建立了高表达OATP1B1的细胞模型，并用荧光素验证了此模型的成功建立。丹酚酸B是丹参的主要药效成分之一，是水溶性的酚酸类化合物，在治疗心血管疾病方面发挥着重大的作用。本实验旨在研究此细胞模型对丹酚酸B的摄取，了解丹酚酸B的摄取机制，进而指导在临床治疗心血管疾病采取联合用药时是否会和其他药物发生相互作用，引发潜在的危险。 关键词 药物转运体；摄取；丹酚酸B；荧光素；心血管疾病；HEK293；质粒提取 Salvianolic acid B uptake mechanism research Abstract Drug transporter is a kind of functional protein or polypeptide present in the cell membrane, and it can affect the pharmacokinetics process of many drugs by uptakeing or effluxing the drug. In this experiment we extract plasmid from Escherichia coli , use the UV spectrophotometric method for the determination of the purity, and transfect it into human embryonic kidney cells (HEK293), letting the plasmid expressed successfully in cell .So we establish the high expression of OATP1B1 cell model, and make sure