第二单元 密理博millipore《Process Monitoring》.pdfVIP

JC 2010 年 03 月 第五期 微生物限度检查在药品生产企业中是非常重要的，在实际的检验过程中，薄膜过滤法基于它的灵敏度高，检测 量大，被广泛的使用。尤其对于抗生素和有抑菌成分的产品而言，薄膜过滤法是优先考虑的检验方法。那是不是不 管什么产品，这种方法的验证都会一帆风顺呢，答案显然是否定的。究竟是什么产品比较难验证，针对它的方法又 该如何优化呢？请接着看下面的文章，希望它能对大家有所帮助。 如何优化抗生素类产品的微生物限度检查方法 我们在与客户的交流中，很多客户都反映抗生素产品的微生物检查方法验证很难成功，其中的难点主要在于抗 生素在滤膜上可能会有残留，因为涉及的产品是强抑菌性的，即使使用了薄膜过滤法，但只要在膜片上还有残留， 那么验证过程中接种的那几种微生物是很难恢复的，有的恢复率甚至为 0 ，更别说要达到药典规定的 70%以上了。 这种情况下，我们会建议客户优化过滤工艺，比如选择合适的冲洗液，增加冲洗次数，选择合适材质的过滤膜 来进行尝试。非常巧的是，我们公司总部最近的实验正是基于这方面的研究，对抗生素的限度验证中的一些重要的 影响因素进行了全面的分析，并给出了令人信服的结论。下面我们就把这份文章的内容翻译后附在后面，跟大家分 享，我相信，这篇文章一定会对大家在实际工作中处理相关工作有很大的帮助。 （如果大家需要全文的电子版，请跟我们联系） 前言： 生物负荷度的检查在药品生产企业中是非常重要的，无论对无菌产品还是非无菌产品，现行的 GMP 都要求对工 艺中每个步骤的微生物含量进行严格的质量控制，以确保最终产品的微生物指标合格。在检验过程中，薄膜过滤法 基于它的灵敏度高，检测量大，被广泛的使用。尤其对于抗生素和有抑菌成分的产品而言，薄膜过滤法是优先考虑 的检验方法。 Tip1 薄膜过滤法与平板法相比较有两大优势，一是检测量大，平板法的检测量最多只能达到 2ml/平板，而薄膜过 滤法可以是平板法的几百倍，这样的样品更具有代表性。二是通过其中的薄膜冲洗步骤，往往能将膜片上残留的抑 菌成分冲洗掉，这样截留在膜上的微生物就能得到恢复。 尽管如此，实际情况中，薄膜过滤法来检测抗生素类产品的微生物还是存在一定难度的。首先，会有一些抗生 素在过滤和冲洗后仍然被某些材质的膜片所吸收保留；其次，不同的过滤装置也会限制薄膜过滤的冲洗能力；最后 有些强抗生素通过正常的过滤和冲洗手段始终达不到满意的微生物恢复率。以上三种因素中的任何一种都会给验证 带来难度，我们只有靠优化方法和工艺，并在验证中不断确认来解决问题。 - 1 - 86-21pmt_millipore@ 下面的实验中，我们会选用不同类别的五种抗生素来进行试验，过滤设备是密理博公司的 Milliflex plus 过滤系 统。无菌的过滤装置会选用两种，一种是密理博公司的 Milliflex 滤杯，另一种是 Microfil S 滤杯。这两种滤杯都能 在 Milliflex plus 过滤系统上使用。对于膜片材质的选择，我们一种是选用通常使用的混纤膜（MCE ），另外一种是聚 偏二氟乙烯膜（ PVDF ）。后者的研究报告表明它对于蛋白类大分子有比较低的吸附，在样品吸附会影响到实验结果 的时候， PVDF 膜无疑是比较好的选择。（后面的实验数据也佐证了这一点） Tip2 Milliflex plus 是密理博公司研制的针对薄膜过滤法的最新的过滤系统，我相信很多的客户的实验室中都已经 购买了这一设备。 Milliflex 滤杯完美的将孔径 0.45um 的滤膜和滤杯整合在一起，膜的过滤面积也是之前的 47mm 单片膜的 约两倍。过滤速度非常的快，膜片边缘与滤杯是通过热密封的，无残留死角。 Microfil S 中的滤膜是封装在滤杯和底座内的。 请参见下面的示意图。左