三种不同消毒剂对饲草菊苣种子萌发和生长的影响.pdfVIP

第19卷第1期 草业学报 253——257 ACTA V01．19，No．1 PRATACULTURAESINICA 2010年2月 三种不同消毒剂对饲草菊苣 种子萌发和生长的影响 张玉1’2，李聪3，白史且1’弘，王涌鑫3，李达旭2 (1．四川农业大学草业科学系，四JII雅安625014；2．四川I省草原科学研究院，四J 成都611731；3．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100094) 摘要：利用正交设计研究了1t 150 发芽率、污染率和发芽指数的影响，并对普那菊苣幼苗生长的影响进行了研究，结果表明，3个因素对发芽率影响差 异都极显著；消毒剂种类和消毒时间对污染率和发芽指数影响差异显著，品种对污染率和发芽指数影响差异不显 著；o．1％HgCl2对普那菊苣生长抑制作用最明显。综合各因素确定，10％HzOz消毒10min是菊苣最佳消毒 方式。 关键词：消毒剂；菊苣；萌发；生长 中图分类号：$351．2；Q945．34文献标识码：A 文章编号：1004-5759(2010)0卜0253—05 无菌种苗是理想的试验起始材料，在分子生物技术的研究咿，经常需要培养无菌苗。在组培中，以无菌苗作 为外植体，可获得愈伤组织和再生植株，进一步进行转基因操作；在高质量的RNA提取中，也要用到无菌苗。 菊苣(Cichorium 常重要。菊苣组织培养中灭菌常采用洗洁剂、酒精和0．1％HgCl。，灭菌时间从5～20 株生长抑制明显‘“。其他植物灭菌多用氯化汞、双氧水、次氯酸钠等消毒，对内生真菌还采用特殊处理嘲。不同 消毒剂灭菌效果不一样，残留物清除的难易程度也有差异，产生的生理影响也不同。因此，本研究采用正交设计， 研究不同消毒处理对菊苣种子消毒效果、种子萌发、幼苗生长等的影响，为菊苣无菌苗的培育、再生体系的建立和 遗传转化提供有益参考。 1材料与方法 1．1供试材料 供试的3个材料均为饲草菊苣，分别为普那(C．intybusCV．puna)、将军(C．intybus intybusCV．guanjun)，由四川省草原科学研究院提供。 1．2种子消毒及培养 分别挑选上述菊苣的饱满种子，采用以下处理：先 表1正交试验【哆(34)表头设计 Table1 formof test 经75％的乙醇表面浸泡30s，再用不同消毒剂浸泡处 Design orthogonaiL，(34) 理，按3因素3水平正交试验，正交表选用L。(34)[6] (表1)，然后用无菌水反复冲洗3～5次，最后浸泡种 子12h，用无菌滤纸吸干表面水分，接种于常规高压 and 灭菌的Ms(Murashige Skoog，1962)培养基上，每 h／d 瓶接15粒，3次重复，(25士2)℃下萌发，光照14 000Ix)。 (光照度2 收稿日期：2009—05—25；改回日期：2009—06—19 基金项目：四川省应用基础项目(2008JY (2006BAD01A19)资助。 作者简介：张玉(1975一)，女，四川仁寿人，在读博士。E-mail：zhyforage(鱼126．corll *通讯作者。E-mail：baituH@yahoo．corn．cll 254 ACTAPRATACULTURAESINlCA(2010) V01．19，No．1 在培养期间，观察统计菊苣种子发芽和污染情况，种子发芽以刚形成胚芽为准，发芽数逐日统计，第7天后计 算发芽率(因此后萌发率已基本不变)，并计算发芽指数